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上海古朵生物有限公司
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CAS:493-95-8,洒维宁,Savinin
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纯度:HPLC≥98%
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文献和实验动物模型构建CRISPR-Cas9 系统作为最新一代基因编辑技术,能够简便高效地实现基因组精确 修饰,是制备哺乳动物疾病模型的重要工具。目前科学家利用 CRISPR-Cas9 技术在动物模型,如小鼠、大鼠、猪 和猴等研制方面做出一系列重要工作。如科学家们将 CRISPR-Cas9 系统导入小鼠受精卵,成功获得了有特定基因突变的小鼠模型,并获得近乎 100% 的基因靶向突变效率,极大地降低了基因编辑小鼠模型制备的难度和成本,有望被广泛应用。背景:使用自主研发的sgRNA设计平台为一个基因位点设计
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括:Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止,CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应(DSB)被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
到的,假如单独敲除这三个基因都没有表型,那我岂不是前功尽弃?那么大的投入可能会没有任何回报,我真的着急了。 好在邦耀给出了一个看起来可行的方案:Cas9在两个位点切开形成双链断裂之后,细胞会启动NHEJ的修复方式将断裂的双链DNA连接起来,这样会有一定概率删除两个靶点之间的序列。我的这个小鼠虽然跨度为95Kb,但他们相信设计2个sgRNA,将中间片段整基因组删除应该是可以成功的。 经过2个月焦虑不安的等待,我终于等到了好消息:95Kb的片段成功的在F0代小鼠里面删除了,而且同时得到了2只
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