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- 2025年07月09日
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上海古朵生物科技有限公司
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—20℃，避光
- 规格：
100ml
货号：GD-F1904-A
名称：碱裂解溶液Ⅲ（制备质粒）
规格：100ml
保存条件：—20℃，避光，6个月
供货能力：现货 作为实验用品，供研究用，不能直接用于人体
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文献和实验质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。质粒的提取方法很多，大多包括3个主要步骤：细菌的培养、细菌的收集和裂解、质粒DNA的分离和纯化。本实验以碱裂解法为例，介绍质粒的抽提过程。实验目的：掌握碱裂解法抽提质粒的原理、步骤及各试剂的作用。实验材料：含有质粒pUC18载体的大肠杆菌菌液，克隆有水稻外源片段的BAC的大肠杆菌菌液。实验原理：在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开
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溶液配制（一）LB培养基每1000 ml加分析纯NaCl 10 g，蛋白胨10 g，酵母粉5 g，用ddH2O配制，再用10 M NaOH调pH至7.4（100 ml一般加450 μl），高温高压蒸汽灭菌15 min冷却后使用。固体培养基加入琼脂1.5%。10 M（或N）NaOH配制方法是称200 g NaOH加300 ml，搅拌充分溶解后定容至500 ml。（二）溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ溶液Ⅰ：葡萄糖50 mmol/L，EDTA 10 mmol/L，Tris-HCl 25 mmol/L，pH
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