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上海古朵生物科技有限公司
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—20℃,避光
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10ml
货号:GD-F1846-A
名称:DNA尿素加样缓冲液(2×)
规格:10ml
保存条件:—20℃,避光,6个月
供货能力:现货 作为实验用品,供研究用,不能直接用于人体
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文献和实验。 a.时间越长,DNA的产量越多,污染也越多 7. 12000转速离心5-10min,去上清,倒置于吸水纸上数分钟,加入700µl 70%的酒精,上下颠倒数次,洗涤沉淀。12000转离心5-10m,去上清,倒置于吸水纸上数分钟。重复一遍。 8. 12000转速离心5-10min,去上清,倒置于吸水纸上数分钟,最后置于超净工作台中吹干。 9. 在离心管中加入30-50µl的灭菌去离子水或者TE溶液,4℃放置数小时,使其充分溶解。 10
组 DNA 的污染? (1)菌体裂解和中和过程中,剧烈混合造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法:温和地进行菌体的裂解和中和。 (2)加 Solution II 时操作时间过长,造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法:将裂解步骤控制在5分钟内完成。 (3)细菌的质量差(反复冻融的细菌,陈旧的细菌,培养条件不合适的细菌等)中有许多断裂或降解而游离的基因组 DNA,使用生长良好的新鲜细菌。 6.加样时 DNA 飘出加样孔外? 忽略或省略了高速离心以甩干残留的 Rinse B 的操作步骤。解决方法:按说
提供的功能参数进行破菌;10 000g 离心,15min ,分别收集上清液和沉淀。 ③ 分别取少量上清和沉淀,加入等体积的2× 凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS -PAGE 。 注意事项:超声破碎与声频、声能、处理时间、细胞浓度、菌种类型等因素有关,应根据具体情况掌握;超声波破菌前,标本经3 -4 次冻溶后更容易破碎。 2 )包涵体的分离 蛋白质在细菌中的高水平表达,常形成相差显微镜下可见到的细胞质颗粒,即为包涵体,经离心沉淀后可用Triton-X100 / EDTA 或尿素洗涤,若为获取
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