Human Granzyme B Valukine ELIS

Human Granzyme B Valukine ELISA Kit

适用于定量检测天然和重组人 Granzyme B 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

I. 背景
颗粒酶B是丝氨酸蛋白酶中，特别在细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤(NK)细胞
的颗粒体中发现的颗粒酶家族成员 (1, 2)。颗粒酶B在颗粒介导的细胞凋亡中发挥重要
作用，并利用此途径中的底物，如Caspase 3, Caspase 8和Bid (3, 4)。最近的研究扩展
了颗粒酶B的功能，发现除了其经典的促凋亡功能外，还包括细胞外的功能。研究发现
颗粒酶B是介导皮肤损伤、修复和炎症的重要介质，通过细胞外底物，包括层粘连蛋白、
VE钙粘蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖聚集蛋白聚糖和核心蛋白聚糖来完成 (3, 4)。
颗粒酶B (32 kDa)是人类基因组中鉴定的五种颗粒酶(A、B、H、K和M)之一，其生
物学功能及在健康和疾病方面的应用研究最为广泛 (4, 5)。颗粒酶B是以前体(247个残
基)形式被合成，具体是由信号肽(1-18残基)、前肽(19-20残基)和成熟链(21-247残基)
组成 (6-8 )。
颗粒酶B一旦进入颗粒内，就被完全加工为成熟链，并当前肽Gly-Glu被组织蛋白酶
C切割从N端去除时，颗粒酶B就成为一种活性蛋白酶 (9)。颗粒酶B的蛋白酶活性受丝
氨酸B9/蛋白酶抑制剂9的严格控制 (9)。人颗粒酶B的氨基酸序列分别与犬、大鼠和小
鼠序列有71%、69%和68%同源性。
研究表明，颗粒酶可调节炎症，与健康对照组相比，过敏性皮肤炎和银屑病患者的
血浆颗粒酶B水平更高。这与血浆颗粒酶A水平不同，血浆颗粒酶A是保持不变的 (10)。
克罗恩病患者血清颗粒酶B水平明显高于对照组 (11)。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Granzyme B抗体包被于微孔板上，样品和
标准品中的人Granzyme B会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入
生物素化的抗人Granzyme B检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉
亲和素标记的辣根过氧化物酶（streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，
加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶
标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。