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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-15℃
- 保质期:
24个月
- 库存:
1
- 供应商:
西安百萤生物科技有限公司
- 规格:
300 Tests
鬼笔环肽-iFluor 680标记
产品优势
高特异性结合:选择性结合F-肌动蛋白(纤维状肌动蛋白),几乎不与G-肌动蛋白(单体肌动蛋白)结合,能清晰显示细胞骨架的精细结构。
低背景干扰 :信噪比高,背景低,成像清晰。
适用样品类型
仅用于固定细胞。固定和透化细胞、细胞培养、无细胞实验、甲醛固定和透化组织切片
产品介绍
鬼笔环肽-iFluor 680标记(与Alexa Fluor® 680标记鬼笔环肽相当)能特异性结合F-肌动蛋白。该衍生物在纳摩尔浓度下即可作为高效探针,用于标记、鉴定和定量分析经甲醛固定透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白。鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合亲和力显著高于肌动蛋白单体,其作用机制主要体现在:1)显著降低肌动蛋白亚基从纤丝末端解离的速率常数;2)通过抑制纤丝解聚过程来稳定肌动蛋白丝结构;3)抑制F-肌动蛋白的ATP水解活性。
鬼笔环肽在细胞内的生物学效应具有明显的浓度依赖性特征。当以低浓度导入细胞质时,它能选择性募集胞质中低聚合状态的肌动蛋白及细丝蛋白,形成稳定的肌动蛋白聚合物"岛",但不会影响应力纤维(即微丝粗束)的结构完整性。这一独特性质使其成为研究细胞内F-肌动蛋白空间分布的理想工具——通过荧光标记的鬼笔环肽类似物对肌动蛋白丝进行特异性染色,可实现光学显微镜下的精细观察。
荧光鬼笔环肽衍生物在生物医学研究领域展现出重要价值:1)可用于活细胞/固定细胞中肌动蛋白丝的精准定位;2)实现体外单根肌动蛋白丝的高清可视化;3)适用于高分辨率肌动蛋白网络研究,这类衍生物已广泛应用于细胞骨架研究。为满足多元化的实验需求,AAT Bioquest公司提供涵盖不同荧光标记的鬼笔环肽衍生物系列产品,为多色荧光成像研究提供全面解决方案。
注意事项
产品外观形态:固体(注:鬼笔环肽系列产品有固体和液体两种,液体为DMSO溶解后的产品,则不需再溶解。)
百萤生物是美国AAT Bioquest品牌代理
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域
美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势,为国内外广大用户提供光谱检测,底物显色,荧光发光技术等全系列解决方案。近年来,百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系;我们的服务宗旨:为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品(AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商,能提供 高性价比的产品)。
2.更低的价格和高性价比的选择,每周都有发货补充,货期短到您意想不到,满足客户的需求就是我们的宗旨,只要您下单,我们就能保证您在短期内收到所需产品。我们将一如既往的为客户和代理商提供售后保障。作为代理,百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其它非科研用途!
产品说明书
样品分析方案
概述
在微孔板孔中制备样品
从样品中取出液体
添加鬼笔环肽-iFluor 680标记溶液(100μL/孔)
在室温下染色细胞20至90分钟
清洗细胞在显微镜下观察样品
注意:将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。
操作步骤
1.制备1000 X鬼笔环肽DMSO储备液:将30μLDMSO加入小瓶中。
2.制备1X鬼笔环肽结合物工作溶液:加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1mL含1%BSA的PBS中。
注意1:鬼笔环肽结合物未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃,避光。
注意2:不同的细胞类型可能染色不同。鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度的制备需要根据实际而定。
3.染色细胞:
3.1执行甲醛固定,在室温下将含3.0-4.0%甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。
注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
3.2用PBS冲洗固定细胞2-3次。
3.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。
3.4将100μL/孔(96孔板)鬼笔环肽缀合物工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3)中,并在室温下染色细胞20至90分钟。
3.5在加上盖玻片之前,用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽结合物,然后在显微镜下进行,密封和成像。
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文献和实验常用抗体标记荧光染料的选择 随着免疫荧光技术的不断发展,荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前,市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列 (Life technology, USA); DyLight系列;Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为AlexaFluor®系列和CFTM系列。CFTM系列染料的核心对比AlexaFluor®系列具有以下几点优势:1. 新型罗丹明核心罗丹明染料以优异
随着免疫荧光技术的不断发展,荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前,市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列(Life technology, USA); DyLight系列; Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为Alexa Fluor®系列和CFTM系列。 一、CFTM系列染料的核心对比Alexa Fluor®系列具有以下几点优势: 1、新型罗丹明核心 罗丹明染料以优异
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