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- AAT Bioquest
- 美国
- 13410
- 2025年12月02日
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12个月
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1
胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿
| 货号 | 13410 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 5 mg | ||
| Ex (nm) | 376 | Em (nm) | 480 |
| 分子量 | 729.65 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，Ac-IETD-AFC是含有乙酰基（Ac）部分的荧光半胱天冬酶-8 /颗粒酶B底物。 该底物被半胱天冬酶8水解，产生高度荧光的7-酰氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC）。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿。
产品说明书
操作方法
以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。
使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。
3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。
4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定
1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
2.根据需要处理细胞。
3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。
4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
5.用HHBS清洗细胞至少一次。
6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）
1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
2.根据需要处理细胞。
3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。
4.用HHBS清洗细胞至少一次。
5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
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文献和实验-DEVD-AMC（caspase-3四肽荧光底物），37°C反应1h，荧光分光光度计（Polarstar）分析荧光强度（激发光波长380nm，发射光波长为430-460nm）。 结果：[图9] 3 流式细胞术分析 方法：收获细胞正常或凋亡细胞？PBS洗涤？加Ac-DEVD-AMC?37°C反应1h?UV流式细胞计分析caspase-3阳性细胞数和平均荧光强度。 结果：[图10]
或凋亡细胞?PBS洗涤?制备细胞裂解液?加Ac-DEVD-AMC（caspase-3四肽荧光底物）?37°C反应1h?荧光分光光度计（Polarstar）分析荧光强度（激发光波长380nm，发射光波长为430-460nm）。结果如图10: 3 流式细胞术分析 方法：收获细胞正常或凋亡细胞?PBS洗涤?加Ac-DEVD-AMC?37°C反应1h?UV流式细胞计分析caspase-3阳性细胞数和平均荧光强度。结果如图11：
【求助】caspase-3抗体与激活型caspase-3抗体
环佩从容 要做下一步实验啦，这两个抗体选哪个呀，目前研究有没有区分哪一个更好点啊 ronaldo_zj 楼主您好。 1. 楼主需要知道Pro caspase-3以及Cleaved caspase-3的功能以及检测手段，不是说哪个好那个不好的问题，而是根据你的课题需要检测何种片段的问题。请楼主先具体查阅关于caspase活化的文献后再定好实验计划； 2. 目前多数研究均认为Cleaved
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