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蛋白酶体20S荧光底物Suc-LLVY-AMC
| 货号 | 13453 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 341 | Em (nm) | 441 |
| 分子量 | 763.88 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
蛋白酶体20S荧光底物Suc-LLVY-AMC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,蛋白酶体的主要功能是通过蛋白水解(一种破坏肽键的化学反应)降解不需要的或受损的蛋白质。 蛋白酶体降解途径对于许多细胞过程是必不可少的,包括细胞周期,基因表达的调节和对氧化应激的反应。 该途径中最常见的蛋白酶体形式是蛋白酶体26S,一种ATP依赖性蛋白水解复合物,其含有一个20S(700-kDa)核心颗粒结构和两个19S(700-kDa)调节帽。 20S核心包含三种主要的蛋白水解活性,包括胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和半胱天冬酶样活性。 它负责细胞凋亡,DNA修复,内吞作用和细胞周期控制所涉及的关键蛋白的分解。
AAT Bioquest提供一组R110底物,用于监测蛋白酶体在不同亚位点的蛋白酶活性,即(i)亚位点:1c,Z-LLE-R110; 2c,Ac-KQL-R110; 5c,Ac-WLA-R110; 1i,Ac-PAL-R110; 2i,Ac-KQL-R110; 5c,Ac-WLA-R110和Suc-LLVY-R110;和5i,Ac-ANW-R110。通过分别使用490nm和520nm的激发和发射波长监测R110随时间的释放来测量蛋白酶活性。我们还提供Suc-LLVY-AMC,非荧光基板产生亮蓝色荧光AMC产品,其Ex / Em = 351 / 430nm,并且可以使用DAPI滤光片组轻松检测。通常,R110底物比基于AMC-,AFC-灵敏得多。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物Suc-LLVY-AMC。
产品说明书
操作方法
以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在DMSO中制备5至10 mM的储备溶液。
2.准备2X蛋白酶体底物(20至50μM)测定溶液,如下所示:
25至50 L底物储备液(10 mM)
100升DTT(1M)
400 L EDTA(100 mM)
10mL Hepes Buffer(25mM),pH = 7.4
3.用2X荧光蛋白酶体底物测定溶液(来自步骤1)混合等体积的质体标准物或样品,并在室温下孵育溶液至少1小时。
4.监测荧光使用荧光酶标仪。
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文献和实验:活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC。在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。 方法:收获细胞正常或凋亡细胞?PBS洗涤?制备细胞裂解液?加Ac-DEVD-AMC(caspase-3四肽荧光底物)?37°C反应1h?荧
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