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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
2年
- 英文名:
LA795细胞
- 库存:
10000
- 供应商:
上海信裕
- 保存条件:
37度
培养基的配置:基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置:DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套(2.5μl、20μl、200μl、1ml),酒精灯1盏,液器1台,斜架1台,酒精喷壶1个,酒精棉球缸1个,污缸1个, 常规耗材:培养瓶(50㎝2),定量移液管(5ml、10ml),枪头(1ml、200μl、10μl),培养皿,6/24/48/96孔板,医用脱脂棉球,保种管 所需试剂:gibco高糖培养基,胎牛血清,双抗,DMSO,胰酶,苯扎溴氨,75%酒精…… 实验前准备: 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内,用酒精喷壶喷洒实验台面,并小鼠肺腺癌细胞闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏,首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边,待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
细胞培养应注意的问题:
细胞培养过程中,从实验室的设计到实验过程中的操作,都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻,所以无论从实验室的设计,还是使用的物品及细胞培养的操作过程,都要注意保持无菌环境。
冷冻保存细胞之方法:
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存小鼠肺腺癌细胞。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度:
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial,融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
应如何避免细胞污染:
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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文献和实验涂片中腺癌(adenocarcinoma)分为分化较好的和分化差两种亚型。 1.分化较好的腺癌细胞:癌细胞体积较大,呈圆形、卵圆形、成排脱落者可呈不规则的柱状。胞质丰富略嗜碱染色,。胞质内可见粘液空泡,呈透明的空泡状,有的空泡很大,核被挤压在一边呈半月状,称为印戒细胞。医学教育|网搜集整理有时在胞质内见到圆形细胞围腺样结构。癌细胞核为圆形或卵圆形、略畸形,染色质丰富,略深染,呈粗块或粗网状,核边不规则增进取,常见1-2个增大核仁直径是可达3-5μm.胞质核常偏于癌细胞的一侧
标题:小鼠肺泡灌洗标准操作规程关键词: 肺泡灌洗;细胞分类计数;细胞因子目的:检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下,肺部出现的各种病理改变。例:哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高,灌洗液中各种细胞因子,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。主体内容(操作步骤):实验的准备实验的器材、仪器、药品:4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS;手术器械:眼科剪,眼科镊,穿刺针或4号半头皮针;血细胞计数板;低温离心机实验操作规程:灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部
丁香园网友kj7156084的培养方法: 本室的PC-3来自上海细胞生物所,种是ATCC的。 以10%FBS+1640或F12培养,0.25%胰酶消化。塑料瓶或玻璃瓶都可以,当然,前者效果较好。复苏时最好用塑料瓶。 5-7天传一次(1:2),2-3天换一次液。尽量高密度传,因为PC-3细胞喜欢扎堆长,如果过了两三天细胞长得不均匀,可以消化离心一下。 传代后一到两天不要动它,要有耐心。 人前列腺癌细胞PC-3(高密
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