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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
2年
- 英文名：
RGC-5细胞
- 库存：
10000
- 供应商：
上海信裕
- 保存条件：
37度
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml）小鼠视网膜神经节细胞株细胞，枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，苯扎溴氨，75%酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边，待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
细胞培养应注意的问题：
细胞培养过程中，从实验室的设计到实验过程中的操作，都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻，所以无论从实验室的设计，还是使用的物品及细胞培养的操作过程，都要注意保持无菌环境。
冷冻保存细胞之方法：
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。小鼠视网膜神经节细胞株细胞
细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度：
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial，融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
应如何避免细胞污染：
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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mammalian oocytes 的研究论文，通过基因编辑技术，他们探索了靶向表观遗传改造是否可以改善哺乳动物的孤雌生殖。他们的研究结果证明，在对 ICRs 进行基因编辑改造之后，能够直接从单个未受精的小鼠卵母细胞产生可存活的足月后代。 本研究报道的哺乳动物的孤雌生殖，是单性生殖的重要科学进步。 图片来源：PNAS 主要研究内容 研究人员指出，由于基因组印记的存在，先前旨在产生哺乳动物孤雌生殖后代的研究工作均失败了。因此，研究人员首先采用了不同的方法尝试去克服这个问题。 他们从雌性小鼠身上取出
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barin 前期的石蜡IHC结果发现某某基因在指定类型肿瘤中是高表达的。 请问用什么指标、方法检测该基因在指定肿瘤细胞株凋亡和增值好呢？ barin 看来只好留着自己解决了。 ylhuang0502 1. flow cytometry or other techniques to detect apoptosis 2. MTT assay for cell
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