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见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 样本:
血清/组织/尿液
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒是用于检测人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)的水平在细胞培养物上清液,血清,血浆及其它合适的样品溶液,仅用于科研——不用于诊断或治疗的目的。
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒检测影响因素分析如下:
一、标本的影响:溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性[2]。所以严重溶血标本禁用。 标本受细菌污染。因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒。 标本保存不当。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。 塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。最好使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。 标本凝固不全。 在工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。
二、 试剂影响 ELISA试剂盒检测试剂厂家较多;不同厂家出产的试剂
灵敏度与特异性存在一定的差别,使用质劣的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。因此,选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。
三、操作技术的影响:吸量不准确人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒,直接影响检测结果。因此加样器也要经常清洗,定期校准。
温育影响:抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求,酶标板周围与内部孔升降温速率不同,造成周边与内部孔结果差异;干浴与水浴存在明显的差异,尽可能使用水浴,并要求固相板放入水中,减少受热不均,贴密封膜,防止污物浸入。
加样次序影响:有时我们在加样过程中,常常会遇到个别标本未离心等情况,为了节约时间,往往这时我们会先加酶结合物,然后等标本分离好后再加标本,这样,竟常常会造成HBeAb和HBcAb的假阴性。因为HBeAb和HBcAb都是竞争抑制法,先加入酶标记的抗体,首先与固相载体上的抗原结合,待加入显色剂后,因酶的存在而显色,故呈阴性[3]。
综上所述,对临床检验ELISA测定中出现的假阳性或假阴性结果,要从多方面进行分析除试剂因素和操作因素之外,更多的应从标本因素方面进行分析,并采取相应措施排除干扰作用。
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