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转血小板基因仓鼠卵巢细胞

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      2年

    • 英文名

      CHO-pt细胞

    • 库存

      10000

    • 供应商

      上海信裕

    • 保存条件

      37度

    转血小板基因仓鼠卵巢细胞培养操作步骤:
    培养基的配置:基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置:DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套(2.5μl、20μl、200μl、1ml),酒精灯1盏,液器1台,斜架1台,酒精喷壶1个,酒精棉球缸1个,污缸1个, 常规耗材:培养瓶(50㎝2),定量移液管(5ml、10ml),枪头(1ml、200μl、10μl),培养皿,6/24/48/96孔板,医用脱脂棉球,保种管 所需试剂:gibco高糖培养基,胎牛血清,双抗,DMSO,胰酶,苯扎溴氨,75%酒精…… 实验前准备:转血小板基因仓鼠卵巢细胞RDC079 小鼠肥大细胞 P815细胞
    Raw-Blue 小鼠单核细胞白血病细胞 Raw-Blue细胞
    RAW264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 RAW264.7细胞
    J774A.1 小鼠单核巨噬细胞 J774A.1细胞
    CT-26.WT 小鼠大肠癌细胞 CT-26.WT细胞
    MPC 小鼠垂体细胞 MPC细胞
    AtT-20 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素) AtT-20细胞
    GT1-1 小鼠垂体瘤细胞 GT1-1细胞
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    NFS-60 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性 NFS-60细胞
    P388 小鼠白血病细胞 P388细胞
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    C3 小鼠白血病细胞 C3细胞
    CASC129 小鼠白血病克隆细胞系 L6565细胞
    L1210 小鼠白血病 L1210细胞
    S180 小鼠艾氏腹水瘤细胞 TCM15S180细胞
    LGZC205 小鼠艾氏腹水瘤细胞 ECA细胞
    RIN-m5F 小鼠β胰岛素瘤细胞 RIN-m5F细胞
    PK136 小鼠X小鼠 PK136细胞 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内,用酒精喷壶喷洒实验台面,并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏,首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边,待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
    细胞培养应注意的问题:
    细胞培养过程中,从实验室的设计到实验过程中的操作,都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻,所以无论从实验室的设计,还是使用的物品及细胞培养的操作过程,都要注意保持无菌环境。
    冷冻保存细胞之方法:
    冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。转血小板基因仓鼠卵巢细胞 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
    细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度:
    冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial转血小板基因仓鼠卵巢细胞,融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
    应如何避免细胞污染:
    细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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