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VA-044(细胞生物级别)

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Wako(和光纯药工业株式会社)
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产品详情

品牌: Wako
货号: 223-02112,225-02111,227-02115
保存条件: 阴暗处
CAS号: 27776-21-2
供应商: Wako
规格: 25g/100g/500g
规格: 25g 产品价格: 询价
规格: 100g 产品价格: 询价
规格: 500g 产品价格: 询价

VA-044

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于脂质提取的聚合物引发剂

 

 

  一个世纪以来,生物学家们一直梦想着能够透过器官甚至整个机体,亲眼看到细胞连接和精细结构,现在随着组织透明化技术的完善,这一梦想终于成为了现实。

 

 

◆原理

 

VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和PFA 形成水凝胶。

2013 年3 月,斯坦福大学的Karl Deisseroth 博士领导的团队在自然杂志(Nature)上发表了Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的论文,文中介绍了制备组织的方法CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。

  CLARITY可用于荧光蛋白质和抗体的免疫染色,可作为解析脑神经回路的有效工具。VA-044是论文实验步骤中透明化工程的使用试剂。

 

 

◆特点• 优势

 

  操作简单,固定蛋白后只需进行电泳;

    可保持组织、器官和全身结构的完整性;

     可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤;

 

 

◆案例•应用

 

Clarity 介绍

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PARS 介绍

2014 年7 月,加州理工学院的研究团队在细胞杂志(Cell)上发表论文Single-Cell Phenotyping within TransparentIntact Tissue through Whole-Body Clearing,将CLARITY 技术推进到一个新的高度——全身组织透明化技术,称为PARS(Perfusion-assisted Agent Release in Situ)。这种技术将透明剂持续泵入动物的循环系统从而进入各个组织,或者通过脑脊液管道泵入大脑,再去除脂质,使器官和生物体被高分子渗透而呈现透明,并可用荧光抗体分析和揭示具有完整连接性的细胞结构和三维细胞排列。

 

 

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图A. PARS 建立的小鼠透明化肠,并用凝集素(lectin)

亚甲基蓝(methylene blue)、DAPI 进行免疫标记后成像 

并获得三种免疫标记的叠加图(merge)

图B. PARS 建立的小鼠透明化肾脏并用抗微管蛋白抗体

和DRAQ5 进行免疫标记后成像,并获得两种免疫

标记的叠加图   

 

 

 

 

CLARITY处理的小鼠脑

 

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CLARITY处理的小鼠大脑成像

 

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CLARITY处理的Thy1-YFP(H Line)小鼠大脑的荧光观察
(A)从大脑皮质到海马的3-D观察图像
(B)大脑皮层Ⅴ层的锥体细胞的树突图像
拍摄条件:双光子   使用设备:Olympus FV1000直立显微镜,25倍浸液物镜

 

 

CLARITY+抗体处理的小鼠大脑成像

 

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CLARITY处理后,用Iba1抗体染色Thy1-YFP(H线)小鼠大脑的荧光观察
(A)在大脑皮质的小胶质细胞的3-D观察图像
(B)从表面层观察皮质Ⅰ层的图像
拍摄条件:单光子   使用设备:Olympus FV1000直立显微镜,25倍浸液物镜

 

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温馨提示:不可用于临床治疗。

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VA-044用于脂质提取的聚合物引发剂    一个世纪以来,生物学家们一直梦想着能够透过器官甚至整个机体,亲眼看到细胞连接和精细结构,现在随着组织透明化技术的完善,这一梦想终于成为了现实。  ◆原理 VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和PFA 形成水凝胶。2013 年3 月,斯坦福大学的Karl Deisseroth 博士领导的团队在自然杂志(Nature)上发表了Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的论文,文中介绍了制备组织的方法CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。  CLARITY可用于荧光蛋白质和抗体的免疫染色,可作为解析脑神经回路的有效工具。VA-044是论文实验步骤中透明化工程的使用试剂。  ◆特点• 优势 ●   操作简单,固定蛋白后只需进行电泳;●    可保持组织、器官和全身结构的完整性;●     可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤;  ◆案例•应用 Clarity 介绍  PARS 介绍2014 年7 月,加州理工学院的研究团队在细胞杂志(Cell)上发表论文Single-Cell Phenotyping within TransparentIntact Tissue through Whole-Body Clearing,将CLARITY 技术推进到一个新的高度——全身组织透明化技术,称为PARS(Perfusion-assisted Agent Release in Situ)。这种技术将透明剂持续泵入动物的循环系统从而进入各个组织,或者通过脑脊液wako223-02112,225-02111,227-02115
VA-044(聚合物引发剂)——新型组织样品制备方法CLARITY相关试剂    Clear Lipid-exchanged Acrylamide-hybrized Rigid Imaging/Immunostating/In situ hybridization-compatible Tissue-hYdrogel,缩写为CLARITY。2013年3月斯坦福大学的Karl Deisseroth博士领导的团队Nature杂志上发表了 Structural and molecular interrogation of intact biological systems 的论文,文中介绍了制备组织的方法CLARITY。  该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结 合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。  特点 • 操作简单,固定蛋白后,只需进行电泳。但是电泳需要2天以上。 • 可保持脑组织结构的完整性。 • 可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤。 关于Clarity 方法 注意事项:Clarity 方法需用4%SDS 进行几天电泳,因此对电泳槽要求较高。 请详细阅读使用说明书后再使用。 产品编号 产品名称 级别 规格 目录价 223-02112 VA-044 细胞生物学级别 wako223-02112;225-02111;227-02115
广州华韵生物科技有限公司是一家致力于各类生化试剂、耗材、仪器等相关产品的研发与销售的综合性生命科学公司,旨在为全国乃至于世界各地科技、工业、电子、医疗、科研机构领域的客户,提供系统的产品资源及配套技术服务。公司有独立的研发、生产、质检、销售、仓库、办公基地。技术人员来自国内第一流的大学和研究机构,具有良好的专业背景与丰富的实践经验。拥有庞大的数据网络,并与国内外最先进的研究机构保持着密切的联系,从而一直走在行业最前列。目前公司的产品线已经超越400000种。华韵品牌系列高端产品长期提供于全国各大科研院校、医院、企业以及国外一些科研机构与大学,受到一致的好评,源叶品牌的产品每一道工序与流程的都有严格控制,华韵人也在不断的努力,力求产品的完美,让每一个客户都可以从华韵产品再次欣赏华韵人精益求精的态度。我们针对科研人员的需要,耗费巨资拍摄了生物实验视频:生物实验高清视频,细胞、分子生物学、蛋白检测技术实验高清视频教程点击进入微信店铺       点击进入淘宝店铺 生物实验高清视频,细胞、分子生物学、蛋白检测技术实验高清视频教程,约7G大小,22个实验项目。适用于教学和学习!本套实验视频制作耗资上百万,由专业的影视和后期制作团队拍摄+生物、医学领域的教授专家指导+Thermo、Roche等著名企业参与共同制作完成。分子生物学实验技术共6个视频,包括:DNA甲基化检测、分子克隆技术、高分辨溶解曲线分析技术(HRM)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、荧光定量PCR(real time QPCR)、原位杂交(ISH)。蛋白检测技术共6个视频,包括:TUNEL法检测细胞凋亡、酶联接免疫吸附测定(ELISA)、免疫印迹法(Western blotting)、免疫组化(IHC)、凝胶迁移实验(EMSA)、染色质免疫沉淀技术(ChIP)。细胞检测技术共10个视频,包括:siRNA转染、大鼠骨骼肌细胞培养、全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞、细胞传代、细胞冻存、细胞复苏、细胞划痕、细胞侵染、质粒DNA转染、组织块贴壁法培养大鼠平滑肌细胞。每个实验视频内容包括详细的实验操作流程,原理讲解,结果分析及疑难解答,并配有相应的详实的文字文档和参考文献!视频截图(部分)1,实验原理介绍2,实验操作流程3,实验结果分析及疑问解答国产/进口s10669
生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2   宮脇敦史博士等人开发了一种水溶状态下不会损坏荧光蛋白,可简便使生物体组织透明化的方法。  对于福尔马林固定的样本,SCALEVIEW®-A2是不破坏其光吸收和荧光,同时可减少光散射的水溶性溶液。仅需将哺乳类动物大脑等生物体组织浸泡于SCALEVIEW®-A2中,即可透明化。  SCALEVIEW®-A2光学特性——折射率ne(20℃)为1.377-1.381。HP数据:理化学研究所 脑科学综合研究中心细胞机能探索技术开发小组濱裕先生、宮脇敦史提供合作:奥林巴斯(Olympus)株式会社参考文献:Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 14, 1481(2011).   ◆SCALEVIEW®-A2 操作案例 以透明化小鼠大脑为样本,SCALEVIEW®-A2透明化方法操作如下: 1. 固定① 用4% 多聚甲醛(PFA)/PBS(pH 7.5~8.0)对小鼠进行灌流固定。② 取出小鼠大脑后,用4%PFA/PBS固定(4℃、10h), 20% 蔗糖/PBS置换(4℃、24h)。③ 用OCT复合物对小鼠大脑进行包埋处理后,液氮进行冷冻。④ 用PBS对冷冻脑组织解冻、清洗后,再用4% PFA/PBS进行再固定(室温、20min) 2. 透明化处理⑤ 将固定好的小鼠大脑浸泡在SCALEVIEW®-A2中(室温)。注意点:  1.每个成年小鼠大脑需要使用30mL以上的SCALEVIEW®-A2。  2.透明化需要1周以上时间。浸泡过程中,需在混匀器等设备中慢慢轻晃溶液。每天更换一次  2.SCALEVIEW®-A2溶液,效果更佳。  3.通过SCALEVIEW®-A2溶液浸泡后,小鼠大脑体积会单方向膨胀10~30%水平。 3. 观察⑥ 观察SCALEVIEW®-A2处理后的小鼠大脑样品使用双光子激光显微镜、奥林巴斯(Olympus)公司  XLPLN25SVMP多光子专用物镜。或使用激光共聚焦显微镜进行观察。⑦ 观察结束后,可将小鼠大脑再次浸泡于SCALEVIEW®-A2溶液中,保存温度4℃。 ◆SCALEVIEW®-A2处理案例 图1. SCALEwako193-18455

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