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- 2025年12月18日
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- 英文名：
L-012
- CAS号：
143556-24-5
- 规格：
100mg
L-012化学发光探针
生化学用 for Biochemistry
规格含量 : 90.0+%（HPLC）
制造商 : FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation（富士胶片和光）
储存条件：冷藏（干冰运输）
CAS RN® : 143556-24-5
分子式 : C13H8ClN4NaO2
分子量 : 310.67
◆基本信息
L-012 是一种高灵敏度的化学发光（CHL）探针，比鲁米诺（Luminol）试剂更有效。L-012 与多种类型的活性氧反应，这些活性氧来自人血液和口腔中激活的中性粒细胞或者大鼠腹膜腔。该产品可以用于有辣根过氧化物酶的ELISA 试剂盒，可提高反应灵敏度。
结构式
溶解及保存：蒸馏水溶解成20 mM/L（6.23 mg/mL）的水溶液，再用50 mM/L的Tris盐酸缓冲液（pH 7.5）稀释 至最终浓度为500 μM/L（有细胞的反应体系）。另外，在没细胞参与的反应体系中时，建议使用终浓度为5~50 μM/L。母液冷冻保存，使用时再稀释。
◆物性信息
| 外观 |
白色~黄色，结晶~粉末 |
| 溶解性 |
可溶于水。 |
◆Q＆A
Q： L-012能渗入细胞吗?
A： 由于L-012对脂质高度亲和，它比luminol和lucigenin更能具有细胞渗透性。另一方面，ROS无限制地在
胞外释放。因此L-012被认为也能检测胞外ROS。
Q： L-012的使用浓度如何?
A： 这取决于应用和条件。
[体外] 培养细胞（EoL-1细胞）： 500 ~ 800 μmol/L.
全血和分离的中性粒细胞： 400 μmol/L
多形核中性粒细胞（PMNs）（由小鼠中分离）： 2 mmol/L
无细胞的样品： 4 μmol/L, 15 μmol/L, and 50 μmol/L
[体内] Balb/c 小鼠[皮下]： 20 ~ 80 μL of L-012(5mg/mL)
Balb/c 小鼠[腹膜内]： 100 μL of L-012 (15mg/mL)
C57BL/10.Q (B10.Q) 小鼠 [腹膜内]： 1 ~ 75 mg/kg
Q： 是否可用于动物活体成像？
A： 如果所用的小动物成像仪中有发光检测探头，就可以进行检测。以下是文献报道过的仪器型号：
・IVIS 100 imaging systems
・Infinite M200 [Tecan]
・Luminescence Reader BLR-201 [Aloka]
・Beckman-Coulter DTX880 multimode plate reader [Beckman]
Q： 是否可用于固定细胞？
A： 目前尚无证据表明，活性氧（ROS）在细胞活性停止后仍然存在。普遍看法是认为在细胞活性停止后
（细胞死亡）ROS消失。固定组织或细胞会停止细胞活性，因此不建议用于ROS检测。
本品无需固定检测对象即可检测到ROS，使用方法包括但不限于将其添加到细胞培养上清液中或进行
动物腹腔注射。
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文献和实验参考文献
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Tsubasa Ogasahara, Yusuke Kouzai, Megumi Watanabe, Akihiro Takahashi, Kotaro Takahagi, June-Sik Kim, Hidenori Matsui, Mikihiro Yamamoto, Kazuhiro Toyoda, Yuki Ichinose, Keiichi Mochida, Yoshiteru Noutoshi Front Plant Sci. 2022; 13: 1004184. Published online 2022 Sep 15. doi: 10.3389/fpls.2022.1004184 PMCID: PMC9521188
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Eunice E. To, Jonathan Erlich, Felicia Liong, Raymond Luong, Stella Liong, Steven Bozinovski, Huei Jiunn Seow, John J. O’Leary, Doug A. Brooks, Ross Vlahos, Stavros Selemidis Sci Rep. 2019; 9: 2366. Published online 2019 Feb 20. doi: 10.1038/s41598-019-38864-5 PMCID: PMC6382773
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Sina Barghahn, Gregory Arnal, Namrata Jain, Elena Petutschnig, Harry Brumer, Volker Lipka Front Plant Sci. 2021; 12: 682439. Published online 2021 Jun 17. doi: 10.3389/fpls.2021.682439 PMCID: PMC8247929
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The Pleiades are a cluster of fungal effectors that inhibit host defenses Fernando Navarrete, Nenad Grujic, Alexandra Stirnberg, Indira Saado, David Aleksza, Michelle Gallei, Hazem Adi, André Alcântara, Mamoona Khan, Janos Bindics, Marco Trujillo, Armin Djamei PLoS Pathog. 2021 Jun; 17(6): e1009641. Published online 2021 Jun 24. doi: 10.1371/journal.ppat.1009641 PMCID: PMC8224859
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Rozalynne Samira, Jennifer A. Kimball, Luis Fernando Samayoa, James B. Holland, Tiffany M. Jamann, Patrick J. Brown, Gary Stacey, Peter J. Balint-Kurti Sci Rep. 2020; 10: 20817. Published online 2020 Nov 30. doi: 10.1038/s41598-020-77684-w PMCID: PMC7704633
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Engineering Smut Resistance in Maize by Site-Directed Mutagenesis of LIPOXYGENASE 3 Krishna Mohan Pathi, Philipp Rink, Nagaveni Budhagatapalli, Ruben Betz, Indira Saado, Stefan Hiekel, Martin Becker, Armin Djamei, Jochen Kumlehn Front Plant Sci. 2020; 11: 543895. Published online 2020 Oct 21. doi: 10.3389/fpls.2020.543895 PMCID: PMC7609844
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Rapid repeatable in vivo detection of retinal reactive oxygen species Ning Fan, Sean M. Silverman, Yang Liu, Xizhen Wang, Byung-Jin Kim, Liping Tang, Abbot F. Clark, Xuyang Liu, Iok-Hou Pang Exp Eye Res. Author manuscript; available in PMC 2018 Aug 1. Published in final edited form as: Exp Eye Res. 2017 Aug; 161: 71–81. Published online 2017 Jun 8. doi: 10.1016/j.exer.2017.06.004 PMCID: PMC5554724
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CRISPR/Cas9-mediated knockout of p22phox leads to loss of Nox1 and Nox4, but not Nox5 activity Kim-Kristin Prior, Matthias S. Leisegang, Ivana Josipovic, Oliver Löwe, Ajay M. Shah, Norbert Weissmann, Katrin Schröder, Ralf P. Brandes Redox Biol. 2016 Oct; 9: 287–295. Published online 2016 Aug 24. doi: 10.1016/j.redox.2016.08.013 PMCID: PMC5021817 |
前言 日本和光纯药株式会社于2009年正式将免疫印迹高灵敏度发光试剂ImmunoStar®LD（code NO.290-69904等）投放市场。这种试剂的发光底物，使用了鲁米的诺衍生物L-012（8-Amino-5-chloro-7-phenylpyrido [3,4-d ] pyridazine-1,4-（2H , 3H ） dione Sodium Salt）。L-012与鲁米诺相比，发光信号更强，性能更优异。然而，正因为ImmunoStar®LD与原有的免疫印迹用发光试剂相比
检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测，我们通常使用碱性磷酸酶（AP）耦联的抗体，采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中，我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测，NBT/BCIP用于显色法检测。同时，对于膜杂交中的化学发光信号的检测，建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
化学发光及生物发光的原理及其应用－化学发光常用的化学试剂及其原理
荧光衍生试剂的开发。 5 ． 吖啶酯类 McCap r 等合成了一系列吖啶酯类化合物，对该类试剂的化学发光机理研究表明，发光效率与试剂中的可解离酸性基团的 pKa 有密切关系， pKa 一般应小于 11 。吖啶酯类化合物是一类很有前途的非放射性核酸探针标记物，用作 DNA 的发光探针，发光量子产率高，稳定性好，标记物对杂交反应的动力学和杂交体的稳定性无影响，可以直接在碱性介质中进行化学发光反应。 以上五种化学发光剂化学发光
