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文献和实验Chromatin Assembly Using Drosophila Systems
15‐ml Wheaton dounce homogenizer, “A” pestle Sorvall Superspeed centrifuge with SS‐34 rotor (or equivalent)
ARABIDOPSIS THALIANA DNA ISOLATION PROCEDURE
(Brinkmann) at medium speed for 1-3 min. until tissue is homogenized. Filter through 4 layers of cheesecloth, then through 2 layers of Miracloth (Calbiochem). Centrifuge 9000 rpm for 15 min. in a Beckman JA-10 rotor. Resuspend pellet in 50
(6)浸入乳胶膜,应用L-4核乳胶液,水稀释4倍。浸膜后的金网,用胶带固定在载玻片上放在密封的黑色塑料盒内,4℃,时间根据同位素种类和靶mRNA含量而定,也可选择不同时间曝光,根据显影强弱确定最终显影的时间。 (7)显影。暗盒自冷房或冰箱中取出后,在室渐中回暖至少30min,以防核乳胶膜皱缩。然后在显影液(Kodax Microdol X)显影3~5min,温度18~24℃。水冲,在15% Kodax快速定影液定影5min,然后在空气中干燥。 所有溶液应尽可能新鲜配制。
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