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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
MagExtractor -Genome-
- 库存:
MagExtractor -Genome
- 供应商:
NPK-101
- 规格:
100次
基因组DNA的抽提试剂磁珠/离心法MagExtractor -Genome-
用磁硅珠可简便地抽提出高纯度的基因组 无需苯酚非常安全
本产品是用来从血液、培养细胞等活体样本中抽提高纯度基因组DNA的试剂盒。回收的基因组DNA可直接用于PCR为主的酶反应中。本试剂盒除了可与核酸自动抽提装置「MFX系列」组合使用外,还可与磁珠分离专用台架一起使用,作为进行B/F(固液)手动分离时的试剂盒。
特征1. 使用于各种不同来源的样品
可从全血、动物培养细胞、动物组织、mouse tail中抽提出基因组DNA。
特征2. 可简便地在短时间内完成抽提
利用磁硅珠对基因组DNA具有吸附性的基本原理,能简便地在短时间内抽提出基因组DNA。抽提血液的时候,可将全血直接作为样品使用。
特征3. 无需苯酚/氯仿处理
无需有害的苯酚/氯仿处理,不会产生废液问题。
特征4. 可纯化出高纯度的基因组DNA
用本试剂盒抽提出的基因组DNA,几乎不含RNA、蛋白质等杂质,可直接用于各种实验。
| 例 |
实验例1. 得率与纯度的探讨
使用本试剂盒和其他公司生产的试剂盒,从100μl全血中抽提基因组DNA。结果可知,使用本试剂盒的得率大致与使用其他公司的试剂盒的得率相等。从纯度方面来看,可确认采用A公司和C公司试剂盒结果混有蛋白质及RNA等杂质,而用本试剂盒则未发现有杂质。因此,通过使用本试剂盒,可以从全血等生物样品中抽提出高纯度的基因组DNA。
实验例2. 抽提DNA的PCR例
从10个无血缘关系的健康人身上各采集100μl全血,用本试剂盒抽提基因组DNA。结果可知,可抽提出A260nm/280nm为1.83〜1.84的高纯度基因组DNA约1.4〜2.2μg。
抽提出基因组DNA后,将1/20的量用Taq DNA Polymerase对含单位点VNTR的MCT118作为目的片段进行PCR。MCT118由16个碱基重复序列组成,根据对它们重复次数的测定,可以用来进行个人识别。由PCR结果可知,该次以MCT118为目的片段的PCR反应检测出了个人特异性DNA条带。
实验例3. 从大鼠组织抽提基因组DNA以及PCR分析例
将-80℃冷冻切片5mg在本试剂盒的溶解・吸附液中进行均质化后,取其离心上清,用本试剂盒抽提其基因组DNA。结果可知,分别得到了基因组DNA 2.3μg、1.6μg。260nm/280nm分别为1.86、1.83。通过Taq DNA Polymerase对抽提得到的DNA进行TNF-α基因(482bp, 1226bp)扩增,可得到良好的结果。
■步骤
本试剂盒根据以下步骤提纯高纯度DNA。
①首先在DNA溶液中加入含有chaotropic盐试剂的吸附液。如果是琼脂糖凝胶的话只要添加吸附液即可将其溶解。
②通过添加、混合磁硅珠,把样品中的DNA吸附到硅胶表面。
③使用洗净液将磁珠洗净,除去蛋白质・盐・dNTPs・引物等杂质。
④使用灭菌水或低盐浓度的缓冲液等,从磁珠上溶出DNA,回收。
■注意事项
MagExtractor试剂盒系列中所含的磁珠组成成分各有不同,不能与其他试剂盒中的磁珠混用。
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文献和实验体系,可直接应用于所有的分子生物学下游研究,包括酶学研究、cDNA文库的构建、RT-PCR、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护、引物扩增、点杂交和斑点杂交、体外转录实验、差异显示和Northern杂交,亦可用于基因克隆及基因表达分析。 本试剂盒的Dynabeads Oligo(dT)25悬浮在pH7.4含有0.02%的叠氮钠作为保护剂的磷酸缓冲液中,浓度为3.3×108个磁珠 (约5mg/ml)。根据组织或细胞类型和mRNA表达水平情况,每200μl(约1mg)的Dynabeads Oligo(dT)25
/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的,往往需要将液氮或者干冰带到采样现场,采样后立即抽提RNA或者运回实验室保存。对于实验者来说非常不方便。著名的QIAGEN公司最近新推出一种RNA抽提试剂:RNeasy Protect Kit,提供一整套RNA保护和分离试剂,从样品的制备到RNA的抽提,只需一个试剂盒即可解决所有问题。保证样品的表达信息不受破坏,确保得到可信的基因表达分析结果。试剂盒里提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent,只要在采样后立即将新鲜
/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的,往往需要将液氮或者干冰带到采样现场,采样后立即抽提RNA或者运回实验室保存。对于实验者来说非常不方便。著名的QIAGEN公司最近新推出一种RNA抽提试剂:RNeasy Protect Kit,提供一整套RNA保护和分离试剂,从样品的制备到RNA的抽提,只需一个试剂盒即可解决所有问题。保证样品的表达信息不受破坏,确保得到可信的基因表达分析结果。试剂盒里提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent,只要在采样后立即将新鲜
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