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基因组DNA的抽提试剂磁珠/离
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MagExtractor -Genome-
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特征1. 使用于各种不同来源的样品可从全血、动物培养细胞、动物组织、mouse tail中抽提出基因组DNA。
特征2. 可简便地在短时间内完成抽提利用磁硅珠对基因组DNA具有吸附性的基本原理,能简便地在短时间内抽提出基因组DNA。抽提血液的时候,可将全血直接作为样品使用。特征3. 无需苯酚/氯仿处理无需有害的苯酚/氯仿处理,不会产生废液问题。特征4. 可纯化出高纯度的基因组DNA用本试剂盒抽提出的基因组DNA,几乎不含RNA、蛋白质等杂质,可直接用于各种实验。
实验例1. 得率与纯度的探讨 使用本试剂盒和其他公司生产的试剂盒,从100μl全血中抽提基因组DNA。结果可知,使用本试剂盒的得率大致与使用其他公司的试剂盒的得率相等。从纯度方面来看,可确认采用A公司和C公司试剂盒结果混有蛋白质及RNA等杂质,而用本试剂盒则未发现有杂质。因此,通过使用本试剂盒,可以从全血等生物样品中抽提出高纯度的基因组DNA。
实验例2. 抽提DNA的PCR例 从10个无血缘关系的健康人身上各采集100μl全血,用本试剂盒抽提基因组DNA。结果可知,可抽提出A260nm/280nm为1.83〜1.84的高纯度基因组DNA约1.4〜2.2μg。 抽提出基因组DNA后,将1/20的量用Taq DNA Polymerase对含单位点VNTR的MCT118作为目的片段进行PCR。MCT118由16个碱基重复序列组成,根据对它们重复次数的测定,可以用来进行个人识别。由PCR结果可知,该次以MCT118为目的片段的PCR反应检测出了个人特异性DNA条带。
实验例3. 从大鼠组织抽提基因组DNA以及PCR分析例 将-80℃冷冻切片5mg在本试剂盒的溶解・吸附液中进行均质化后,取其离心上清,用本试剂盒抽提其基因组DNA。结果可知,分别得到了基因组DNA 2.3μg、1.6μg。260nm/280nm分别为1.86、1.83。通过Taq DNA Polymerase对抽提得到的DNA进行TNF-α基因(482bp, 1226bp)扩增,可得到良好的结果。
■步骤本试剂盒根据以下步骤提纯高纯度DNA。
①首先在DNA溶液中加入含有chaotropic盐试剂的吸附液。如果是琼脂糖凝胶的话只要添加吸附液即可将其溶解。②通过添加、混合磁硅珠,把样品中的DNA吸附到硅胶表面。③使用洗净液将磁珠洗净,除去蛋白质・盐・dNTPs・引物等杂质。④使用灭菌水或低盐浓度的缓冲液等,从磁珠上溶出DNA,回收。■注意事项MagExtractor试剂盒系列中所含的磁珠组成成分各有不同,不能与其他试剂盒中的磁珠混用。
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