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北京盛科博源生物科技有限公司
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文献和实验ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer
ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer Day -2: o Start a 5ml overnight culture from a single colony. Day -1: o Start a larger overnight culture using part of the 5ml culture (subculture). Day
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)
gel Antibodies to native protein of interest (or a post-translationally modified form) Antibody (control) Cell lysis buffer for ChIP (cold) Cells (50-100 million per experiment) Dilution buffer EDTA Elution
做 ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)已经几个月了,虽时间不长,但深刻体会细节决定成败,这里就把自己认为值得注意的细节总结如下: 1、cell counting:尽量做到准确,会影响 input 结果。 2、cross link:甲醛的终浓度是 1%,这个基本所有的 protocol 上都会强调。 3、resuspend cells with SDS:一定要选用小的 tip 头,在液面下吹打,否则很容易产生气泡,后面的 sonication 就麻烦
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