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- 2025年07月13日
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北京盛科博源生物科技有限公司
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Overview This protocol is a variant of the Hanahan protocol [1] using CCMB80 buffer for DH10B, TOP10 and MachI strains. It builds on Example 2 of the Bloom05 patent as well. This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) cells
CCMB buffer to make chemical competent cell
, but you need a big clone or several clones. :D LB media is OK, OD less than 0.8 is OK This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) , DH5α cells. 1 Preparing glassware and media 2 Preparing seed stocks 3 Preparing competent cells 4 CCMB80
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
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