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Expi293 Met (–) 表达培养基是按照 cGMP 生产的、化学成分明确、无血清、无蛋白、非动物源性、无蛋氨酸培养基,用于 Expi293F 细胞的生长和转染。培养基是 Expi293 平台的一部分,用于哺乳动物 HEK293 细胞的快速、高产量瞬时蛋白表达。其设计用于与 ExpiFectamine 293 Met (–) 转染试剂盒结合使用,用于需要标记蛋白中蛋氨酸残基的应用。注:除非补充了蛋氨酸,否则培养基不支持细胞生长或表达。
Expi293 Met (–) 表达培养基特点包括:
•支持悬浮 293 培养物的生长,使密度达到超过 1.5 x 107 个细胞/mL
•与 Expi293 表达培养基(货号A1435101)的性能相当
• 不含蛋氨酸
• 不含酚红
• 使用 GlutaMAX I 补充剂配制
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文献和实验Karthaus, 分享了他们的实验。 一、实验设计 选择三种经常用到的表达系统: Expi293TM – protein expression in HEK293 cells ExpiCHOTM - protein expression in CHO cells ExpiSfTM – protein expression in insect cells 分别在 293,CHO,和 Sf9 细胞中表达 mCherry-His 和 mCherry-Twin-Strep-tag® 蛋白,使用
,并聚集成为包涵体。经过诱导,目的蛋白通常可达细胞总蛋白的50%以上。虽然有一定比例的蛋白以可溶的单体形式存在,而多达95%(甚至更多)的蛋白则在包涵体中。实践中,有很多实验室采取降低诱导温度,例如 25–30°C (Burton et al. (1991)Prot.Exp. Purif.2, 432-441),或降低IPTG浓度(0.01–0.1mM)并延长诱导 时间,还 有采用特别的培养基 (Blackwell and Horgan (1991) FEBS Lett. 295, 10-12)等方法
(Chemically Defined, Serum-free CHO Media, Non-animal Origin CHO Expression Media) ProCHO无血清培养基(Serum Free Media, SFM)是专为促进CHO细胞重组蛋白的表达和下游反应而合成的。这种培养方法不需要任何动物来源的成分即可支持高密度的细胞培养。其中的极低水平的重组蛋白有助于下游的纯化和调控。 产品的应用:CHO细胞内重组蛋白的表达 Pro293无血清培养基
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