低离子强度pH缓冲液，用于低离子强度样本—上海甄准

【资源】转帖：蛋白质纯化技术指南

，通过选择不同的缓冲液，同一种蛋白既可以和阴离子交换树脂（能结合带负电荷的分子）结合，也可以和阳离子交换树脂结合。树脂所用的带电基团有四种：二乙基氨基乙基用于弱的阴离子交换树脂；羧甲基用于弱的阳离子交换树脂；季铵用于强阴离子交换树脂；甲基磺酸酯用于强阳离子交换树脂。蛋白质由氨基酸组成，氨基酸在不同的pH环境中所带总电荷不同。大多数蛋白在生理pH（pH 6—8）下带负电荷，需用阴离子交换柱纯化，极端的pH下蛋白会变性失活．应尽量避免。由于在某个特定的pH下不同的蛋白所带电荷数不同，与树脂的结合力也不同

IHC原理、操作及注意事项

两者之间，选择室温孵育有助于实验流程的便利，同时也适用于较多样本的检测。二抗一般室温孵育 30 min。 切片清洗(浸洗、冲洗和漂洗) 为了防止一抗、二抗等残留而引起非特异性染色，适当地加强清洗尤其重要，建议使用洗瓶冲洗 30 s X 3 次，而一抗孵育后可用 TBST 单独清洗。清洗中要注意单独冲洗，防止交叉反应造成污染，同时温和冲洗，防止脱片。TBS 的 pH 和离子浓度建议用为 7.6-8.0，浓度是 0.01 M。中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度

免疫沉淀反应（三）——对流免疫电泳实验

缓冲液中进行电泳，它带有负电荷，而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷，这样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。而一般的蛋白质（如血清抗原）也受电渗作用的影响，使泳动速度减慢，但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流，在两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。一、材料 1. 诊断血清：免抗人免疫血清 2. 待检血清：人血清 3. 阴性对照血清 4. pH8.6、离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84 g，巴比