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西宝生物
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1 ml
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文献和实验刺激的细胞,直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)中,然后进行第2步。 1.2 加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS), 300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 红细胞裂解 2.1 如需裂解红细胞(如脾脏),将10x红细胞裂解液(ACK buffer)用去离子水稀释到1x,放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中,室温孵育2-3分钟;如不需要裂解红细胞,直接进入第3步,。 2.2 加入10mL细胞染色buffer(或含1%BSA
(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
In Situ Hybridization Using Digoxigenin Labeled Probes
as black bands. Weaker signals are brown Solutions: 1) 10X PBS 1.3 M NaCl 0.07 M Na2HPO4 0.03 M NaH2PO4 2) Hybridization Buffer 0.6 M NaCl 50 mM Sodium phosphate buffer, pH 6.8 1X Denhardt's (0.02% BSA / 0.02% Ficoll / 0.02
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