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- 详细信息
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低温
- 保质期:
详询
- 英文名:
Sfi I
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详询
- 供应商:
biorbyt
- 规格:
400 Units
产品名:Sfi I
货号:orb94060
产品中文名:Sfi I
产品详情链接:https://www.biorbyt.com.cn/sfi-i-orb94060.html
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文献和实验KpnⅠ MluⅠ NotⅠ SacⅡ SalⅠ SfiⅠ
.3.5)。截切-优化-延长的方法(图 16.1 A ) 优越于其他方法之处在于它的简单性,因为它不依赖于结构信息,也不需要知道同源蛋白。然而,如果目前的数据能够提供这样的信息,截切设计的过程将会更直接,在某些情况下甚至更有效。最后,本章所描述的方法还有一个优点,那就是用该方法得到的热稳定突变体能够在生理温度下筛选而得。 2. 材料 2.1 质粒构建、DNA 混编和随机突变 ( 1 ) Pr_sfi_pelB_DG_blawt 的正向
-PCR技术扩增出小鼠抗体重链、轻链可变区基因(VH,VL),PCR扩增条件为:94℃ 1?min,55℃ 2?min,72℃ 2?min。循环30次。用Linker将等摩尔量的VH,VL交联形成单链抗体可变区片段(ScFv)。经NotⅠ、SfiⅠ双酶切后,在T4连接酶的作用下与经同样双酶切的pCANTAB5E载体相连,转化入大肠杆菌TG1以构建鼠抗内毒素单链噬菌体抗体库。在援救噬菌体抗体库后,用内毒素淘筛特异性的ScFv,富集的噬菌体阳性克隆 重新感染TG1。然后在96孔板分别援救单个含特异性ScFv
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