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文献和实验生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低生产成本和减少血制品带来的潜在危害性,动物细胞生产开始使用无血清培养基(SFM),但SFM往往导致细胞活力差,贴壁性差,分泌外源蛋白的能力差等缺点。另有研究者尝 试将类胰岛素生长因子IGF基因和转铁蛋白基因转入CHO细胞获得能自身分泌必需蛋白的“超级CHO”,无需在培养基中转铁蛋白和胰岛素,细胞可在SFM中生长良好。与其他表达系统相比,CHO表达系统具有以下的优点:(1)具有准确的转录后修饰
清培养试验步骤1、实验材料CHO细胞株购于俄罗斯Soym Agromed,无血清培养基(CHO-S-sFM1I)购于Gibeo公司。2、实验方法(1)无血清培养基的配制用90ml纯水溶解制备1升量的袋装Gibeo CHO-S-sFM1I,加人2.45g NaHC03,用 1N NaOH将pH调为8.0,再用1N HC1调回至pH7.1,定容后用0.22μm滤器过滤除菌。(2)CHO细胞的适应用含血清的常规培养基和无血清培养基1:1(v/v)悬浮细胞,接种量为3×105个/ml。在37℃,8%培养箱中培养
生产成本和减少血制品带来的潜在危害性,动物细胞生产开始使用无血清培养基(SFM),但SFM往往导致细胞活力差,贴壁性差,分泌外源蛋白的能力差等缺点。另有研究者尝试将类胰岛素生长因子IGF基因和转铁蛋白基因转入CHO细胞获得能自身分泌必需蛋白的“超级CHO”,无需在培养基中转铁蛋白和胰岛素,细胞可在sFM 中生长良好。与其他表达系统相比,CHO表达系统具有以下的优点:(1)具有准确的转录后修饰功能,表达的蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子;(2)既可贴壁生长,又可以悬浮培养,且有较高
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