改良番茄汁琼脂培养基基础

　　广东环凯微生物科技有限公司是广东省微生物研究所属下的国家级高新技术企业(广东省微生物研究所隶属于广东省科学院)，自1993年成立以来，一直致力于生物安全监测与控制产品的研发、生产和经营。公司是国内食品安全检测和控制高技术产品的重要研发和生产基地，是业内领先的技术创新中心，近年来通过承担国家和省部级食品安全科技项目共70多项，取得国家和广东省科学技术奖励12项，获得国家专利31项，发表相关学术论文近200篇。

　　027310　改良番茄汁琼脂培养基基础

　　(Modified Tomato Juice Agar Base)

　　[改良番茄汁琼脂培养基基础用 途]：

　　用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T16347-1996，GB/T4789.35-2003和SN/T1941.1-2007)。

　　原 理：

　　番茄汁可提供碳源、蛋白质等营养物质;牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。

　　[改良番茄汁琼脂培养基基础配方(每升)]：

　　酵母膏粉 5g

　　牛肉膏粉 10g

　　乳糖 20g

　　葡萄糖 2g

　　磷酸氢二钾 2g

　　吐温-80 1g

　　乙酸钠5g

　　琼脂15g

　　最终pH 6.8±0.2

　　[改良番茄汁琼脂培养基基础使用方法]：

　　1、切碎洗净的新鲜番茄，放入三角瓶，置4℃冰箱8—12h，取出后用纱布过滤。称取本品60g，加入950 ml蒸馏水或去离子水和50ml番茄汁，搅拌加热煮沸至完全溶解，校正pH后分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。

　　2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内，振摇均匀，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

　　3、选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

　　将培养基凉至50℃左右，将培养基注入平皿中约15mL，待琼脂凝固后，翻转平板，置于36±1℃温箱中培养72±3h。

　　选择菌落数在30—300个之间的平皿进行计数。计算后，随机挑取5个菌落数进行革兰氏染色，显微镜检查并做过氧化氢酶试验。革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，无芽孢的球菌或杆菌可定为乳酸菌。根据证实为乳酸菌落计算出该皿内的乳酸数，然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中乳酸菌数。例如，检样10-4的稀释液在改良TJA培养基平板上，生成的可疑菌落为35个，取5个鉴定，证实为乳酸菌的是4个，则1 mL检样中乳酸菌数为：

　　4

　　35× — ×104=2.8×105

　　5

　　[改良番茄汁琼脂培养基基础质量控制]：

　　下列菌株接种后于36±1℃培养72h结果如下：

菌 名	菌 号	生长状况	生长特征
保加利亚乳杆菌	As1.1482	良好	平皿底为黄色，菌落中等大小，微白色，湿润，边缘不整齐，直径3±1mm，如棉絮团状菌落
乳链球菌		良好	平皿底为黄色，菌落光滑，微白色，湿润，边缘整齐

　　

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g