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- 文献和实验
- 技术资料
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(160ng/mL) | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)ELISA试剂盒操作步骤
- 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 80ng/mL | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 40ng/mL | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 20ng/mL | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 10ng/mL | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 5ng/mL | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
- 温育:人肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)ELISA试剂盒用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
- 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
- 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
- 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
- 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
- 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
xy-E10852 人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA试剂盒
xy-E10853 人组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒
xy-E10854 人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒
xy-E10855 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒
xy-E10856 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒
xy-E10857 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒
xy-E10858 人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒
xy-E10859 人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒
xy-E10860 人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒
xy-E10861 人周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISA试剂盒
xy-E10862 人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒
xy-E10863 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒
xy-E10864 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒
xy-E10865 人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒,人(IRF)ELISA试剂盒
xy-E10866 人解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒
xy-E10867 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒
xy-E10868 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA试剂盒
xy-E10869 人乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒
xy-E10870 人乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒
xy-E10871 人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA试剂盒
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文献和实验灭活内源性酶及封闭内源性生物素 在生物体组织内均含有一定量的内源性酶和内源性生物素,如富含血细胞的组织标本有大量具有活性的过氧化物酶,肝、脾、肾、脑及胚胎组织中富含生物素。 如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时.酶的作用是催化底物,使显色剂显色,而组织中的内源性酶同样也能催化底物,使其显色,这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫组织化学染色中,内源性生物素易结合亲和素,形成亲和素一生物素复合物,导致假阳
,细胞在其中的生长速度更高,而且没有任何外源生长因子。 图1. 组织脱细胞概览。脱去猪源器官(肝、肺、心等)中的细胞,溶解剩余的天然组织特异性ECM成分并冻存备用。这种dECM水凝胶可用于传统的2D ECM包被,也可用于包裹细胞进行3D细胞培养。 我们的组织特异性dECM脱细胞基质水凝胶试剂盒是从多种健康猪器官(骨、心、肝、肾、肠、皮肤和肺)中提取出来的一系列天然脱细胞基质(dECM)。这种dECM水凝胶可用于传统的2D ECM包被,也可用于包裹细胞进行3D细胞培养,性能均高于同类水凝
直线斜率不难计算出该酶反应的活化能E。 但是,测定酶时都需要酶和底物在一定温度下作用一段时间,在此期间,温度有可能使酶失活,不同酶在此方面差异很大,有些酶如胎盘碱性磷酸酶在56℃放置15分钟,活性也不下降,有些酶如酸性磷酸酶,37℃1小时后,失去50%酶活性。酶的稳定性还与其它因素,如作用时间、pH、有无底物、有无其它蛋白等有关。同为碱性磷酸酶,在肝提取液中远不如血清中稳定,37℃作用15分钟后肝中此酶活性将显著下降。又如将血清pH降低在pH6.0以下,血清中酸性磷酸酶将长期稳定
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