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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
● -20°C to -70°C for 12 months in lyophilized state; ● -70°C for 3 months under sterile conditions after reconstitution.For long term storage, the product should be stored at lyophilized state at -20°C or lower.
- 英文名:
ActiveMax® Human Oncostatin M (OSM) Protein, Tag Free
- 库存:
1///10///1
- 供应商:
ACROBiosystems
- 规格:
50ug/1mg/20ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2310 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥15750 |
| 规格: | 20ug | 产品价格: | ¥1260 |
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文献和实验,然后将细胞在含有1%BSA(PBA)的PBS中洗4次。用含有PBA溶解的0.1%Triton® X-100的10%驴血清封闭细胞45分钟。然后加入10 μg/mL的一抗,孵育3个小时,之后把细胞在PBA中清洗三次,每次洗5分钟。然后,用5 μg/mL的NothernLightsTM557连接的二抗(R&D Systems)孵育细胞1个小时,然后如上清洗细胞。 STAT3活化水平:用Active STAT3 DuoSet IC®试剂盒(R&D Systems)检测STAT3的活化
,但其同时也可以耐受多种缓冲液的使用。下面让我们对二者进行各项数据进行比较: 耐受的纯化条件 下表为 His-tag 与 Strep-tag® 系统的耐受缓冲液对比:如果分离纯化膜蛋白或包涵体时,则纯化过程需要涉及到变性条件。 Strep-tag® 系统最多允许的尿素浓度为 6M,盐酸胍为 1M,而 His-tag 则为 8M 和 6M。如若需要增加蛋白的溶解度,使用去垢剂,则两种系统均可兼容 Triton-X100,Tween 20 和 Nonidet P40。 但不是所有的蛋白过表达
获得纯度高的膜蛋白。 图 2. 利用QIAGEN Ni-NTA membrane Kit筛选最适合NhaA 的去污剂类型。 实验结果表明,OG和NG不适合该膜蛋白的溶解,可以选择DM, LDA0, DDM Cy6, 和FOS 进行NhaA溶解. M: His-tagged marker proteins。 图 3. 选择DDM进行NhaA的溶解,然后利用Ni-NTA进行纯化。 TP: total protein; SF: soluble fraction; FT: flow
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