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| 别名: | 胰蛋白酶(牛胰脏) ;胰蛋白酶(牛胰脏) |
| CAS号: | 9002-07-7 |
| 分子式: | C6H15O12P3 |
| 分子量: | 372.1 |
| EINECS编号: | 232-650-8 |
| MDL号: | MFCD00082094 |
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| 介绍: | 胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白水解酶,属白色或微黄色冻干粉制品。它能特异性地水解碱性氨基酸精氨酸及赖氨酸羧基所组成的肽键。酶本身很容易自溶,其作用最佳的PH值为8.0~9.0。胰蛋白酶活性能被胰腺中的天然抑制剂所抑制。钙离子能延迟胰蛋白酶的自溶,并能促进胰蛋白酶原的活性。 |
| 贮存: | -20℃保存。 |
胰蛋白酶(猪胰脏)
化学试剂纯度的具体分类等离子体质谱纯级试剂(ICP-Mass Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于0.1ppb,适合等离子体质谱仪(ICP Mass)日常分析工作。等离子体发射光谱纯级试剂(ICP Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于1ppb ,适合等离子体发射光谱仪(ICP)日常分析工作。
原子吸收光谱纯级试剂(AA Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于10 ppb ,适合原子吸收光谱仪(AA)日常分析工作。
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文献和实验溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ,轻轻搅拌均匀,25℃放置2~4h,或4℃放置12~16h,使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况,直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500~4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5~3.0,滤纸过滤,滤去硫酸钙沉淀,收集滤液,4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100
一、原理与目的 提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。 胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活。因此提取制备胰酶的全部操作过程应在低温和低PH下进行。胰酶以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。胰蛋白酶原在正常生理条件下可被肠激酶和钙离子所激活或自我环化成为有活性的酶。猪胰蛋白酶
进口胎牛血清提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在 75% 饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在 10% 硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,后在 PH8.0peng 酸缓冲液中得到结晶。本实验拟通过从猪胰脏中制备胰酶结晶实验,掌握酶的制备、一般分离、提取、纯化和结晶的操作技术。同时为亲和层析、免疫学实验准备实验样品。1、胰蛋白酶原的提取与分离:称取 1-1.5 Kg 新鲜猪胰脏,在冰浴下剥除脂肪和结缔组织,在低温下用绞肉机绞碎胰脏 (或用高速组织匀浆机捣碎) 加 1-2 倍
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