临床小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。
操作小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒的主要常用类型及步骤
| 测 定 |
以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 |
| 温 育 |
用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 |
| 加 酶 |
每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 |
| 显 色 |
每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。 |
| 终 止 |
每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 |
| 基本用途 |
小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒用于含量测定。 |
| 注意事项 |
本品应在低温下保存，长时间在暴露在空气中，含量会有所降低 |
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述，ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA包含以下各组分：
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
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