FICOLL 400

FICOLL离心

问：FICOLL离心后分界面不清楚一般是什么原因？答：原因有很多种：1、FICOLL没有室温平衡；2、血液稀释时没有充分混匀；3、加血的时候就分层不清；4、血液抗凝不充分，细胞成块，建议采好血后室温放置半小时~1小时期间不时的混匀；5、个体差异，同一种实验条件，不同来源血可能情况不一；6、离心速度过小以致尚未完全分层，或离心期间速度不稳定；7、降速太快，降速时间应5min以上。答：1、比例要恰当：稀释后的血液：淋巴细胞分离液为1：1。2、血液平铺到淋巴细胞分离液上是否分层清晰？3、离心机不能

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项 外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。PBMC 可利用健康人或动物供体的外周血，通过 Ficoll 密度梯度离心，磁珠分选等步骤获得，主要包括淋巴细胞和单核细胞。 Ficoll 是蔗糖的多聚体，中性，平均分子量 400,000，当密度为 1.2

如何配制400ml固体lb培养基？

基加入1.5g琼脂粉 2、抗生素 的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。 3、倒板：一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。 4、保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了，pH还是要按规定的。