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一年以上
- 库存:
大量
- 供应商:
索莱宝
- CAS号:
--
- 规格:
3ml
货号:DA1016
规格:3ml/10ml
试剂盒内容:
| DA1016-3 | DA1016-10 | 保存温度 | |
| 溶液 A | 3ml | 10ml | 2-8℃避光 |
| 溶液 B | 3ml | 10ml | 2-8℃避光 |
| 溶液 C | 60ml | 100ml×2 | 2-8℃ |
保存: 2-8℃避光密闭保存,请勿冻存;复检期至少 1 年。
产品简介:
增强型 DAB 显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP) ,用于免疫组化显色、原位杂交显 色或 Western、Southern 、Northern、EMSA 等膜显色的试剂盒。 DAB 是辣根过氧化物酶的常用底 物。在辣根过氧化物酶的催化下,DAB 会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。
本产品采用特殊配方,灵敏度高,背景低,重复性好,储存稳定,使用方便,适合于蛋白印迹、 免疫组织化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。
操作说明(仅供参考):
1. 对于组织切片或蛋白质印记膜,在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵 育后,用适当洗涤液洗涤 3-5 次,每次 3-5 分钟。
2. 50 μl 溶液 A、50 μl 溶液 B、900μl 溶液 C,并混合均匀,即为 DAB 工作液,1h 内使用。
3. 向组织切片或膜上加入适量 DAB 工作液,确保能充分覆盖样品。
4. 室温避光孵育 1-30 分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般 3-10 分钟最理想),并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
5. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止 后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
1.DAB 溶液 A 切勿冻存,以免影响染色效果;
2.显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;
3. DAB 在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因 DAB 分解影响实验, 或因渗漏造成实验环境污染。
4. DAB 有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。
5. DAB 溶液 B 不稳定容易降解,请妥善保管。
相关产品:
P1032 20×PBS, PH7.2-7.4
G1080 Mayer 苏木素染液(免疫组化)
A2010 AEC 底物显色试
相关文献:
[1] Hongying Diao,Bin Liu,Yongfeng Shi,et al. MicroRNA-210 alleviates oxidative stress-associated cardiomyocyte apoptosis by regulating BNIP3. Bioscience. June 2017. (IF 5.876)
[2] Hongming Zhang,Moyan Liu,Yuyan Zhang,et al. Trimetazidine Attenuates Exhaustive Exercise-Induced Myocardial Injury in Rats via Regulation of the Nrf2/NF-κB Signaling Pathway. Frontiers in Pharmacology. March 2019. (IF 3.845)
[3] Bo Shi,Shixing Li,Hao Ju,et al. Protein kinase C inhibitor chelerythrine attenuates partial unilateral ureteral obstruction induced kidney injury in neonatal rats. Life Sciences. January 2019;216:85-91. (IF 3.448)
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文献和实验。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
梯度(两个孔)取其平均值减去空白后制作标准曲线得到曲线公式。测得的样品的 OD 值(三个孔)取其平均值按标准曲线的公式运算得到蛋白浓度,按 50 μg/上样孔的标准来计算上样量,算法为:上样量= 50/蛋白浓度。注:所有得到的 OD 值必须减去背景(标曲中空白孔的 OD 值)后再计算。 样品处理: 蛋白样品:5×SDS 上样缓冲液按照 4:1 比例混合沸水浴 10 min 左右。浓度过高的样品可用 PBS 稀释后再煮样。样品煮好后 -20 ℃ 保存待用(可保存半年),样品长期保存须置于 -70










