10ml 方孔 24 孔透明深孔板 ；灭菌

实验室常用消毒与灭菌技术

性细菌芽胞作指示菌，以测定热力灭菌的效果。菌种用嗜热脂肪杆菌，本菌芽胞对热的抗力较强，其热死亡时间与病原微生物中抗力最强的肉毒杆菌芽胞相似。生物指示剂有芽胞悬液、芽胞菌片以及菌片与培养基混装的指示管。检测时应使用标准试验包，每个包中心部位置生物指示剂2个，放在灭菌柜室的5个点，即上、中层的中央各一个点，下层的前、中、后各一个点。灭菌后，取出生物指示剂，接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，置55-60℃温箱中培养48小时至7天，观察最终结果。若培养后颜色未变，澄清透明，说明芽胞已被杀灭。达到了灭菌

ELISPOT标准操作程序（protocol）

在孔壁上，盖上板盖，轻轻叩击，让Magi™ Coating Buffer顺势滑落。Magi™ Coating Buffer一旦接触到PVDF膜，就会在表面张力和毛细作用之下迅速浸润整块膜，使得膜的颜色和透明度发生变化。3、包被：润湿之后，无须洗涤。每孔加入50μL PBS稀释好的包被抗体，4°C包被过夜。4、封闭：（次日）倾倒包被液，用PBS洗涤3次。最后一次，在灭菌的吸水纸上扣干。200μL/孔加入用1×PBS稀释好的封闭液，37°C封闭1h。5、倾倒封闭液，无须洗涤，直接加入检测细胞进行

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

条件下 220g 离心 5min。 19、将类器官沉淀重悬于 700μl 预冷的 DMEM / F12中，使用移液器吹打数次，机械地破坏类器官。 20、将所得细胞悬液重复 8-12 步骤，完成传代。   类器官冻存 21、取 1-4 个孔的类器官，消化离心后取细胞沉淀，加入 1ml 细胞冻存液。 22、将细胞重悬后转移至冻存管中，利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 23、第二天，将样品转移到液氮中长期储存。   类器官复苏 24、将液氮冻存的 OC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻，水浴