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细胞上清液提取常见问题解析

上清液。 PBS重悬的外泌体初始液 12,000 g，2 min 离心 2-3 次至无明显沉淀，每次离心收集上清液，上清液再进行EPF柱纯化。 建议：细胞培养使用低血清或者无外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基，培养时间控制在24 - 48 h 左右 ，收集上清液时培养基颜色正常，不要等到偏黄色时再收集上清液。 11、EPF柱是否可以多次使用？ 不能重复使用。过量的样品会超出纯化柱的使用极限，会严重影响分离效果。 12、外泌体如何保存？ 纯化后的外泌体可于 4℃ 保存不超过一周，-80℃ 条件下可长期

吃糖会改变你的大脑！耶鲁大学的科学家找到了高糖高脂饮食让人上瘾的原因

的脂肪和糖。另一组参与者食用的布丁含有相同的热量，但脂肪和含糖量更少。在正常饮食之外，两组参与者均每日食用小布丁，持续八周。同时，在试验开始前和试验八周期间检测参与者的大脑活动，评估体重指数、饥饿评分和血液指标（葡萄糖、胰岛素、甘油三酯和糖化血红蛋白水平）。 图 2：来源 Cell Metabolism   研究结果   正如研究团队最初所预料的，历时八周的实验结果显示，食用高糖和高脂肪布丁的人群的大脑对高脂肪和高糖食物的反应大大增加，改变了对低脂食物的偏好。   研究者对大脑活动的测量结果表明

干货：外泌体研究实操中的常见问题解答

和数量充足，干细胞/原代细胞上清可在提取前采用超滤管（100KD）浓缩 3~5 倍后再提取。 3、使用EPF柱时堵塞如何处理？ 答：过滤柱的孔径在 220nm 左右。如果出现堵塞情况，可以将柱子旋转 180 度再次离心。若上室还有残留液体，需要使用新的 EPF 柱，该柱子可以单独购买（货号 UR90102）。 4、沉淀法的具体原理是什么？ 答：将高亲水性聚合物（聚乙二醇等）添加到含外泌体的溶液中后，外泌体周围的水分子被聚合物束缚，降低了外泌体的溶解度并诱导其随后的沉淀，使外泌体在低速离心下可以很容易