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- 英文名：
脱氧核糖核酸酶I
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嵘崴达
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−20°C
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1 kit
脱氧核糖核酸酶I
Amplification Grade
别名:
脱氧核糖核酸酶 I（DNA酶I）
一般描述
脱氧核糖核酸酶I（DNase I）是一种从牛胰腺中分离的内切核酸酶，可将双链和单链DNA消化成寡核苷酸和单核苷酸。 扩增级 DNase I 已纯化去除RNase活性，适于在 RT-PCR（逆转录酶 - 聚合酶链反应）等敏感应用之前去除 RNA 制剂中的DNA。
DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。采用提供的反应缓冲液，在室温下消化 15 分钟，可去除 RNA 制剂中的 DNA。然后随同终止液加热，使DNase I失活。加热还会使RNA中的发夹变性，可直接用于逆转录。
当前没有任何 RNA 分离程序可以 100% 去除 DNA。 许多商业DNase I 制剂受到了残留RNase污染。 这种RNase污染会在逆转录以前破坏或分解有价值的RNA样品。实验室比较表明，Sigma′的扩增级 DNase I 的RNase活性低于几家领先的分子生物学产品供应商产品。
应用
扩增级脱氧核糖核酸酶I（DNase I）已用于：
- 在 RNA 的分离和纯化过程中消化 DNA。纯化的 RNA 可用于通过RNA 逆转录酶合成 cDNA。
- 水解细胞外基质 (ECM) 成分并增强光敏剂在生物膜中的渗透以确定抗菌光动力疗法 (aPDT) 对白色念珠菌生物膜的功效
- 从牛血样中提取的总 RNA 中去除污染 DNA
特点和优势
- 适用于去除 RNA 中的 DNA
- 超低RNase活性
- 经过优化的10×反应缓冲液和终止液，可使DNase I完全失活
适用性
适用于去除 RNA 制剂中的 DNA。
单位定义
在 37 °C 下，一个单位可在 10 min 内将 1μg 质粒DNA 消化为寡核苷酸。
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文献和实验为对 DNA有特异作用的、可水解核苷酸间的磷酯键的具有解聚化作用的核酸酶（一种磷酸酯酶），缩写 DNase。可从各种生物和组织中分离出来，但这些酶在细胞中的作用尚不清楚。根据 DNase的作用机理，可分为二种，即可将分子链内部的磷酸二酯键水解的核酸内切酶（脱氧核糖酶Ⅰ等），以及对分子链末端分阶段作用生成单核苷酸的外切核酸酶。 DN- ase的测定方法有以下几种：（ 1）对伴有 DNA分解时的粘性下降的测定；（ 2）对由分解生成的酸溶性生成物量的测定（全磷量在 260毫微米时的吸收
最有代表性的核酸内切酶。最早是由 M． Kunitz从胰脏中分离出结晶的，也称为胰脱氧核糖核酸酶或 DNaseⅠ， EC3． 1． 21． 1。分子量约 3.1万，等电点 pH4.7，最适 PH 7附近，需要 Mg2 和 Mn2 。分离单链和双链 DNA，产生具有 5′ -磷酸末端的分解物。在一般条件下其分解产物含有 1到 8— 12个寡聚核苷酸，平均大小等于四个核苷酸。反应初期似乎是先分解 dpPupPy键，但因二价离子的存在对切断的方式有显著影响。因此酶容易得到结晶
微球菌脱氧核糖核酸酶 deoxyribonuclease micrococcal
在金黄色化脓微球菌（ Micrococcus pyoge－ nes var． aureus）等于金黄色葡萄球菌（ Staphylococ－ cus aureus）的培养液中发现的核酸内切酶，致病性越强的菌株产生的越多。最适 pH在 8.6附近，反应必须有 Ca2 （ 10mM），能水解单链和双链 DNA。此酶对热极稳定， 95℃加热 15分钟几乎不失活。反应开始可选择性地切断 Xp－ Tp和 Xp— Ap键，最后分解至单核苷酸和二核苷酸为止。这些核苷酸全都带有 3＇ -磷酸末端
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