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Restriction End
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Restriction Endonuclease Dpn I
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嵘崴达
−20°C
1000 UNITS
同裂酶该酶是Bsp143 I、Dpn II、Mbo I、Nde II和Sau3A I的同裂酶。甲基化敏感性如果不存在6-甲基腺嘌呤,该酶仅在指定位点(*)处出现5-甲基胞嘧啶时发生抑制。典型的连接和再切割检测将通过完全消化1μg pBR322 DNA所获得的Dpn I片段在+4°C下与1U T4 DNA连接酶在10μl含有66mM Tris-HCl、5mM MgCl2、5mM二硫苏糖醇、1mM ATP、pH 7.5(在+ 20°C时)的缓冲液中连接16小时。可连接并随后用Dpn I重新切割的产物的百分比(产生pBR322×Dpn I片段的典型模式)已在分析证书的“Lig”和“Rec”下列出。
Dpn I需要腺嘌呤残基甲基化才能发挥活性,因此只能消化包含N6-甲基腺嘌呤的GmATC序列。这样的甲基化序列是由dam甲基化酶产生的。甲基化的这种要求将Dpn I与Mbo I和Sau3A I区分开来,其中Mbo I的活性会被dam甲基化所抑制,Sau3A I不会受到甲基化的影响。并且,Dpn I在识别序列上的切割位点也与Mbo I和Sau3A I不同。
识别位点:GmAT * CGmAT * C限制性切割位点:GmA↓T*CGmA↓T*C热灭活:在65°C孵育15分钟后Dpn I未失活。
在PCR介导突变中,DpnI核酸酶已被用于PCR后的野生型DNA的消化。
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
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