from T4 plasmid pTL43W infected Escherichia coli 71–18
别名: DNA polymerase, polymerase, T4
一般描述
T4 DNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 DNA 聚合酶,催化脱氧核苷-5′ 的加-三磷酸盐到达隐性末端的羟基末端。
该酶具有非常活跃的 3′→5′核酸外切酶,对单链 DNA 具有高度特异性;它缺乏 5′→3′核酸外切酶活性。
T4 DNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 DNA 聚合酶,催化脱氧核苷-5′ -三磷酸盐到达隐性末端的羟基末端。
该酶具有非常活跃的 3′→5′核酸外切酶,对单链 DNA 具有高度特异性;它缺乏 5′→3′核酸外切酶活性。
内容物
酶溶液,1 U/μl,溶于缓冲液,pH 8.0
孵育缓冲液,5x 浓缩
应用
T4 DNA 聚合酶用于标记 3′-DNA 的末端。通过置换反应实现广泛标记,其中 3′-酶的核酸外切酶活性首先消化 dsDNA,产生具有凹陷 3′-终点。在随后加入标记的 dNTP 时,T4 DNA 聚合酶的聚合酶活性再延长 3′沿模板长度结束。来自 大肠杆菌 的核酸外切酶 III 可用于生成部分单链 dsDNA 用于随后的聚合反应。标记为高比活度的分子主要用作杂交探针。与缺口平移法制备的探针相比,它们有两个优点:缺乏人工发夹结构,用合适的限制性内切酶切割很容易将它们转化为链特异性探针。结合 T4 基因 32 蛋白,T4 DNA 聚合酶用于定点突变实验中的补缺。
样品材料:带 5′ -末端突出的 DNA
定点突变:与 T4 基因 32 蛋白一起,T4 DNA 聚合酶可以填补定点突变实验过程中的单链缺口。