ASB5 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5

端粒酶活性检测操作必知

132位氨基酸的碱基匹配，扩增后得到150bp产物，柱纯化后备用。每个TRAP反应加入15ag内标为模 板，TS和CX引物既可扩增端粒酶延伸产物，又可扩增150bp的内标，当无150bp扩增带出现时说明存在Taq酶抑制剂，这对内标为众多学者所采用。也有其它学者采用200bp或36bp的内标[4,8,14]。(3)稀释提取液可降低酶抑制物浓度，扩增带从无到有说明含酶抑制物。为了减少甚至排除某些标本中存在的抑制物的影响，许多学者在得到端粒酶延伸产物后进行酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)抽提，酒精

如何用外泌体「套路」申请关于国自然？

过滤孔，导致膜的寿命减短，分离效率较低。同时，外泌体会粘附在膜上，导致产量降低。 免疫磁珠法：用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响，不利于下游实验。 试剂盒分离法：目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样，提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高，且外泌体的得率和纯度一般，不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌

别小瞧了ELISA

，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高