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D2650-100ML DMSO Sigma
31149-10G-F 鱼精DNA Sigma
E7023-500ML 乙醇 Sigma
50531-10G 甘草酸铵 Sigma
L5750-500G SDS Sigma
S4641-25g 柠檬酸三钠 Sigma
G9268-100G 玻璃珠 Sigma
S5390-1KG 蔗糖
A1296-500G 琼脂 Sigma
A1049-100MG 脱落酸 Sigma
M8250-25G MES Sigma
M4125-100G D-甘露糖醇 Sigma
C7902-500G 氯化钙二水 Sigma
P3911-500G KCl Sigma
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M6250-100ML Sigma
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L5750-500G SDS Sigma
D5879-100ML DMSO Sigma
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G6378-100UN 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 Sigma
M4125-100G D-甘露糖醇 Sigma
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文献和实验ml of X-gal staining buffer with 1 mg/ml X-gal (make 40mg/ml stock in DMF, store at -20OC; don't use if discolored). Incubate at 30OC for 24 -48 hrs, or less if expression is strong 5. Clear in acetone, rehydrate and stain in carmine alum O/N.
将其稀释至 1 mg/mL 以降低缓冲体系中去污剂的浓度（但对于那些在细胞中表达水平较低的蛋白而言，10 mg/mL 这样更高的浓度可能对免疫沉淀更有效一些）。 加入推荐体积的免疫沉淀抗体至 500 µL 细胞裂解液中与目标蛋白反应。（抗体的最适用量要根据每一细胞模型中免疫沉淀靶蛋白的数量来确定）。 将细胞裂解液与抗体轻轻混匀后孵育 2h，或 4℃ 缓慢振荡过夜。（选择孵育 2h 常用于免疫沉淀与激酶或磷酸酯酶作用的活化酶。）加入100 µL Agarose protein A+G 轻轻振荡 1h
pH8.0PBS、1%硫柳汞、离心机及离心管、烧杯（25ml）搅拌器、无菌吸管，无菌吸管及毛细滴管、烧杯（500ml）透析袋等。(2)方法及步骤①抗体准备 用o～4~C的pH8。0磷酸盐缓冲盐水将球蛋白溶液稀释至浓度为30～40mg／ml，置入25ml烧杯内，放于冰槽中。②荧光色素准备 按每毫克免疫球蛋白加入荧光素0．01rug计算，称取所需的荧光素，用3％碳酸钠水溶液溶解。③将准备的抗体与荧光色素溶液等量混合，充分搅匀，在o～4~C冰箱中结合(最好在磁力搅拌机上持续搅拌)18～24h。④透析
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