一般描述
β-D-葡糖醒酸苷葡糖醒酸苷水解酶
葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原则之一。许多呈现给人体的物质都经历代谢过程,包括通过UDP-葡萄糖醛酸转移酶(UGT)与葡萄糖醛酸结合。这种酶催化葡萄糖醛酸基转移到许多生物和药理活性的内源性和外源性分子。与原始分子相比,葡萄糖醛酸苷通常更易溶解,毒性更小,更容易被人体排泄。为了分析体液(如尿液和血浆)中存在的这些药物缀合物,葡萄糖醛酸苷的去缀合是必要的。
用于掺杂的物质与葡萄糖醛酸结合,这意味着有效的掺杂分析通常依赖于由β-葡萄糖醛酸酶对结合药物分子进行酶促裂解。
酶特性
大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶基本上不具有硫酸酯酶活性,在切割类固醇和苯二氮杂共轭物方面特别有效。
β-D-葡糖醒酸苷葡糖醒酸苷水解酶
EC 3.2.1.31
特异性
切割末端葡萄糖醛酸,β-与单糖、寡糖或多糖或苯酚相连。
应用
β-葡萄糖醛酸酶已广泛用于研究和分析实验室,用于酶法水解类固醇β-葡萄糖醛酸苷。β-葡萄糖醛酸酶用于:
- 水解尿液(pH6.0–6.5)中的类固醇缀合物(葡萄糖苷酸);
- 分析兴奋剂;
- 检测小剂量苯二氮。
- 在GC-MS、HPLC、免疫测定或其他分析方法之前,在样本制备过程中,用于切割葡萄糖醛酸苷。
它已被用于水解血浆肠内酯、睾酮和表睾酮葡萄糖醛酸苷。
生化/生理作用
葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原理之一。提供给人体的许多物质都要经过代谢处理,包括在UDP-葡萄糖醛酸基转移酶(UGT)作用下与葡萄糖醛酸结合。β-葡糖苷酸,也称为β-D-葡萄糖苷酸,可催化葡萄糖醛酸基转移至许多生物学和具有药理学活性的内源性和外源性分子。与原来的分子相比,葡糖苷酸通常更易溶、毒性更小、且更易被人体排泄。为了分析这些存在于体液(如尿液和血浆)中的药物偶联物,必须对葡糖苷酸进行解偶。分析过程中,检测前的酶促水解对于实现高灵敏度必不可少。水解后,样品可通过质谱法、气相色谱法、HPLC、免疫测定法或其他分析方法进行分析。
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