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- roche
- 11480022001
- 2026年03月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
见产品外包装
- 英文名：
Tth DNA Polymerase
- 库存：
需确认
- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
见产品外包装
- 保存条件：
−20°C
- 规格：
500 UNITS
Tth DNA聚合酶
pkg of 500 U (2 x 250_U), sufficient for ≤200 reactions
别名:
DNA polymerase, polymerase
一般描述
Tth DNA聚合酶是从嗜热真细菌Thermus thermophilusHB8中分离出来，纯化后没有非特异性脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶。这种酶是一种进行性5′-3′DNA聚合酶，没有3′-5′核酸外切酶活性。该酶在大约pH9（+25℃调整），温度+75℃时活性最高。它在高温（95℃）延长反应中依然保持活性。
应用
嗜热菌（Thermus thermophilus）（Tth）DNA聚合酶能用于：
- 通过聚合酶链反应（PCR）扩增DNA片段，由于其在高温（95°C）长时间培育依然保持活性
- 放射性标记核苷酸、di高辛或生物素标记的DNA片段，由于其能将修饰的脱氧核糖核苷酸用作底物
- 有效地将靶标RNA转录为cDNA，由于其内在的Mn依赖性逆转录酶（RT）活性
- 用于实时PCR
生化/生理作用
嗜热菌（Thermus thermophilus）（Tth） DNA聚合酶是一种具有热稳定性的DNA聚合酶，有逆向转录酶活性。此酶是高度进行性的5′-3′DNA聚合酶，缺乏3′-5′核酸外切酶活性（校对）。 内在的逆向转录酶（RT）活性在镁离子存在的条件下，转录效率高远高于大肠杆菌DNA聚合酶I和Taq DNA聚合酶的转录效率。RT 活性和核酸酶H活性无关。Tth DNA聚合酶在较高的温度范围（最佳范围+55℃到+70℃，最高温度+95℃）依然有活性，克服了RNA二级结构问题。生成的cDNA在Mg2+存在的情况下，可通过相同的酶进行PCR扩增。Tth DNA聚合酶能够在较高的温度范围进行逆向转录和DNA扩增，因此可用于对细胞和病毒RNA进行定量RT-PCR、克隆和基因表达分析。Tth DNA聚合酶可用于最多1kbRNA RT-PCR扩增。
特点和优势
Tth DNA聚合酶：
- 确保优化聚合酶链反应（PCR）得到的产品大小在RT-PCR反应中至少达到1,000 bp
- 可将修饰的脱氧核糖核苷三磷酸用作底物
- 与核酸酶 H活性无关
- 具有高温热稳定性可以克服该问题，高温热稳定性通常与RNA中存在的高级二级结构有关
包装
1个试剂盒包含3个组分
| 11480022001 | Tth DNA Polymerase, 500 U DNA聚合酶 | 2 x 250 U |
| 3335399001 | Protector RNase Inhibitor, 200 保护酶抑制剂 | 2,000 U |
| 10885860001 | Restr.-Endonucl. Nhe I, conc., | 1,500 U (40 U/µl) |
| 11008943001 | Restr.-Endonucl. Spe I | 200 U (10 U/µl) |
| 11014714001 | Restr.-Endonucl. Not I, 1000 u | 1,000 U (10 U/µl) |
| 11037668001 | Restr.-Endonucl. Not I, conc., | 1,000 U (40 U/µl) |
| 4655885001 | Transcriptor One-Step RT-PCR K 转录因子 | 1 kit 150 rx of 50 µl |
| 10220566001 | Restr.-Endonucl. Sma I, 1000 U | 1,000 U (10 U/µl) |
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文献和实验We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
. Did He Really Invent PCR? • The basic principle of replicating a piece of DNA using two primers had already been described by Gobind Khorana in 1971:– Kleppe et al. (1971) J. Mol. Biol. 56, 341-346. • Progress was limited by primer synthesis and polymerase
能催化从四种5′-脱氧核苷三磷酸游离出焦磷酸而使DNA进行聚合反应的酶。EC2.7.7.7.。必须以DNA为模板，合成的DNA与模板具有互补的碱基排列（碱基互补性）。是与DNA复制和修复有关的重要的酶，虽可从许多组织分离出来，但对大肠杆菌的这种酶的研究较为先进。康伯格（A.Kornberg，1958）最初从大肠杆菌将此酶纯化，并弄清了其结构和特异性，但以后经过分子遗传学的研究，已明确了这种酶主要与DNA修复有关。因此重新进行与DNA复制有关酶的检索，发现两种新的酶。康伯格最初发现的酶称为
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