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Hybridoma Fusion and Cloning Supplement
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嵘崴达
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−20°C
- 规格:
10 ML
杂交瘤融合和生长补充剂
solution, suitable for hybridoma, Mycoplasma, tested
别名:
HFCS
一般描述
由白蛋白、胰岛素、转铁蛋白、细胞因子、胆固醇源、其他确定的有机和无机化合物以及胎牛血清组成的培养基补充剂(终浓度:0.5%)。
HFCS含有人类蛋白。人类蛋白所分离自的原材料已进行了是否存在肝炎B表面抗原(HBsAg)以及HIV-1/2抗体的检测且结果为阴性(根据目前的质量控制程序)。
应用
杂交瘤融合和克隆补充剂(HFCS)可用作正常培养基的补充剂以支持融合后和克隆过程中B细胞杂交瘤的生长。HFCS可替代滋养层细胞。它还可以用于液氮中细胞在解冻后优化杂交瘤的生长。
外形
溶液(50x浓缩,pH 7.4);通过0.2 μm孔径滤膜过滤
制备说明
工作浓度:HFCS (50x)是采用基础培养基按1:50 (v/v)进行稀释的。强烈建议使用RPMI 1640。最终的培养基中还应包含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
分析说明
生物活性:测定了杂交瘤细胞系的高克隆效率。
| 11363735001 | Hybridoma Fusion and Cloning Supplement (HFCS) | 10 ml (50x) |
| 11829696001 | Peroxidase Labeling Kit | 1 kit (5 labeling reactions) |
| 4727894001 | G418 Solution, 100 ml | 100 ml (5 x 20 ml, equivalent to 5 g) |
| 11047825001 | Endoproteinase Lys-C Seq. Grad赖氨酸-C | 3 x 5 µg |
| 11493027001 | IsoStrip Mouse MAB Isotyping K小鼠抗体试剂K | 1 kit (10 tests) |
| 11585045001 | Cellular DNA Fragmentation ELI细胞DNA片段 | 1 kit (500 tests) |
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文献和实验,得到的一部分融合杂交细胞既能继续生长,又能分泌抗羊红细胞抗体,将这种杂交细胞系统称为杂交瘤,应用这种方法可制备单一抗原决定簇的单克隆抗体. 事实上在此之前,1970年Sinkovics等人已经报导过产生特异性病毒抗体的淋巴细胞和由病毒引起的肿瘤细胞可以自然地在体内形成杂交瘤分泌特异性抗体.1973年Schwaber与Coken首次报导了鼠-人杂交瘤的成功.1974年Bloom与Nakamura首次应用人的B细胞与人的骨髓瘤细胞融合产生淋巴因子.以后于1980年Luben与Molle证明,在体
采用。本节介绍化学融合方法。抗体分泌细胞是由免疫 动物(小鼠或大鼠)的脾脏或淋巴结制备,与骨髓瘤细胞混合,并用PEG使之融合。5-15天后,仅杂交瘤开始在选择培养基(见前)中生长。其后测定杂交瘤分泌的特异抗体,一旦选出合用的阳性细胞,则进行克隆,亚克隆及冻存。 图 2-3-1 通过药物筛选杂交瘤示意
由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
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