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联硕生物
联硕生物是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下,公司的服务和业务网络已遍及全国,成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来,联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚;诚信为本的理念,致力于做靠谱放心的专业服务商,助力您的科研成就!
主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
联硕生物(上海-浙江)
公司官网:www.biolianshuo.com
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文献和实验板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
一单菌落于 2 mL LB 培养基中,37 ℃ 以 200 rpm 速度振荡培养 12~16 h;3. 取 1 mL 上述培养物接种于 100 mL LB 培养基中,37 ℃ 以 200 rpm 的速度震荡培养直至 A600 值为 0.5~0.6 (大约 3 h);4. 将菌液置冰浴 10 min,然后 2,500×g,4 ℃ 离心 20 min 收集菌液;5. 弃上清,倒置离心管 1 min 除净剩余液体,然后加入 10 mL 冰冷的 100 mM CaCl2 液悬浮细胞,冰浴 10 min
水中。以0.22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中,保存于 -70℃。 · 液体培养基 (1 liter) :称取21 g之Difco PPLO broth,0.02 g phenol red 于600ml蒸馏水中,加热搅拌溶解之。灭菌121℃,15分钟。待温度降低至室温后,于无菌操作台内加入200ml马血清,100ml之15% yeast extract solution,及100ml解涷之10x stock solution,混合均匀后,分装至已灭菌之有盖螺旋试管中,10ml/管。保存
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