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文献和实验Plant DNA methylation analysis by bisulfite genomic sequencing
) at temperature appropriate for used restriction enzyme; Add 0.5ml Tris-buffer-saturated phenol-chroroform, vortex; Centrifuge with Eppendorf 5414 or equivalent at 10000 x g for 2 minutes; Transfer the upper aqueous phase to clean 1.5ml
【原创】OMEGA质粒提取试剂盒说明书: 给刚进实验室,又需要做质粒提取的XDJM
100%乙醇到DNA Wash Buffer Concentrate中. 室温保存除试剂盒外还需准备:可达到10000×g的离心机无核酸酶的离心管无菌去离子水或TE缓冲液纯乙醇操作规程:(提取过程在室温下进行):1. 在10-20ml试管中,将携带有所需质粒的E.coli接种到5ml LB培养基LB(含氨苄青霉素50μg/ml),37cº振荡培养12-16h。需特别指出的是:endA阴性的E.coli菌株用于常规质粒提取,如DH5α和JM109.2. 取1.5~5ml菌液室温10000×g离心
核酸提取(The Extraction of Nucleic Acid)
.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2,加水定容至1L,高压灭菌,室温保存。 5)饱和氯化钠,70%乙醇,氯仿 6)饱和酚 【实验步骤】 饱和氯化钠抽提法提取外周血DNA 1.取0.5ml抗凝全血,加入0.8ml TE(pH 8.0)混匀; 2.室温离心,10000rpm ,1分钟; 3.弃上清,加入0.4ml TE(pH 8.0),混匀,悬浮细胞; 4.加入10mg/ml蛋白酶K 5μl(终浓度100μg/ml),10% SDS 25μl(终浓度
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