Transcriptor HiFi cDNA Synth.

Protocol for First-strand cDNA Synth

for 10 minutes and then at 37°C for 60 minutes. Stop the reaction by heating at 70°C for 10 minutes. Chill on ice.  Note   The synthesized cDNA can be amplified by the PCR (see Protocols for PCR using Taq and Pfu DNA

科研锦鲤，你准备好了吗？

结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶，建议向厂商索取的检测数据（如分子信标法检测，Ma et al., Anal Biochem, 2006），以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率，对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低，而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能，可以校正错配，保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下

通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析

公司），按照生产商的建议从HeLa细胞中提取总RNA（每个类似物miRNA三个生物学复制）。同时，使用High Pure miRNA Isolation Kit（罗氏公司），按照使用说明书上的指导，提取包含小分子量RNA在内的总RNA（两个生物学重复）。按照生产商的指导，使用Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit（罗氏公司）和oligo（dT）18 与随机六聚体引物的混合物，按照每次反应500到1000ng总RNA的量进行第一链cDNA的合成