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HW-尺寸排除树脂是一种大孔树脂。它由乙烯醇和甲基丙烯酸酯共聚而成的半坚硬的球状体。表面有许多羟基和醚键因此具有亲水性。HW分为五种系列HW-40、HW-50、HW-55、HW-65、HW-75。HW-65是Toyopearl离子交换、疏水反应、亲合树脂的基体。
Toyopearl 阴离子交换树脂:TSK-GEL DEAE-5PW, TSK-GEL Super-5PW,Toyopearl DEAE-650, Toyopearl SuperQ-650, Toyopearl QAE-650,阳离子交换树脂:TSK-GEL SP-5PW,Toyopearl CM-650,Toyopearl SP-550,Toyopearl SP-650。
疏水反应树脂:TSK-GEL Ether-5PW,TSK-GEL Phenyl-5PW,Toyopearl Ether-650,Toyopearl Phenyl-650,Toyopearl Butyl-650,Toyopearl Hexyl-650。
亲和色谱树脂:Toyopearl AF Amino-650;Toyopearl AF Carboxy-650;Toyopearl AF Epoxy-650;Toyopearl AF Formyl-650;Toyopearl AF Tresyl-650;Toyopearl AFBlue-650,Toyopearl AF Chelate,Toyopearl AF Red-650。
了解详情请登录北京绿百草网站:www.greenherbs.om.cn,Tel:01051659766
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文献和实验」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点,「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷,能够加速大家的纯化之路,由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一:凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因:缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞;流速过快、流动相粘度(如乙醇等)过高、温度过低。 建议处理方法:首先卸柱子,确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了:参考说明书 CIP 操作进行清洁;更换层析柱顶端滤膜
膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 方法
烯酰胺凝胶电泳可有效分离膜镶嵌蛋白质。 下面要介绍的方法是以离子交换层析替代 2D-GE 电泳中 IEF,如果样品量充足,还可以辅以凝胶过滤色谱层析 [7] 。最终用 SDS-PAGE 电泳进一步分离膜镶嵌蛋白质。经过上述这些分离过程,许多膜镶嵌蛋白的胶内酶解和 MALDI-TOF/MS 分析获得了成功。 这个方法的目标之一是在一个单一的实验构架内,分离膜组分中不同类别的蛋白质,包括大部分的疏水、酸性和碱性蛋白。它们可通过染色胶和 MALDI-TOF/MS 蛋白质指纹谱进行蛋白质分析。本章节介绍
用离子交换单一的方法也得不到纯的蛋白,还需要其他的纯化步骤。2.4 亲和层析亲和层析基于目的蛋白与固相化的配基特异结合而滞留,其他杂蛋白会流过柱子。本方法存在的问题是:单抗非常昂贵,而且也需先纯化;单抗与目的蛋白结合力太强.要用苛刻的条件来洗脱,这会使目的蛋白失活并破坏单抗;混合物中的其他蛋白如蛋白酶也可能破坏抗体或与它们非特异结合;某些单抗也会在纯化过程中从树脂上解离下来混入产物中,也需要从终产物中去除。亲和柱通常在纯化过程的后期应用,此时标本体积已缩小,大部分的杂质已经去除。谷胱甘肽S一转移
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