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- Roche
- 罗氏11054589001
- 2025年11月10日
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- 英文名：
Endoproteinase Asp-N Sequencing Grade
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- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
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- 保存条件：
2-8°C
- 规格：
3 X 2 μG
胞内蛋白酶 Asp-N 测序级
from Pseudomonas fragi
别名:
protease
一般描述
野生型莓实假单胞菌分离一种金属蛋白酶，其在小亲水性氨基酸处裂解肽键 N-末端。该菌株的一个突变体产生胞内蛋白酶 Asp-N 测序级，分离得到高纯度和特异性蛋白酶。
特异性
胞内蛋白酶 Asp-N 测序级是一种金属蛋白酶。在 pH 6.0-8.5 的磷酸盐、醋酸盐或 Tris 缓冲液中，特异性裂解天冬氨酸和半胱氨酸的 N 端肽键。如果半胱氨酸还原或烷基化，仅--Asp-X 裂解。
以胰高血糖素为底物，验证了胞内蛋白酶 Asp-N 测序级的特异性。孵育高浓度的胞内蛋白酶 Asp-N 测序级（1 份（按重量）酶和 10 份（按重量）胰高血糖素），以检测痕量杂质，如污染蛋白酶。
热灭活： 煮沸 5 min 使蛋白酶停止。
应用
使用胞内蛋白酶 Asp-N 测序级进行蛋白结构分析和序列分析。
制备说明
工作浓度： 2 μg/50μl 双蒸水
1 瓶（= 2μg 酶）溶解于 50μl 双距离。水的缓冲液浓度为 10 mM Tris-HCl pH 7.5。
工作液： 推荐溶剂为双蒸水。
储存条件（工作液）：-15 至-25°C
双联稀释法溶液。水在 2 ~ 8°C 下最多可稳定 1 周，在-15~-25°C 下可稳定约 1 个月；应避免反复解冻。
重悬
用 50μl 双蒸水复溶测序级冻干胞内蛋白酶 Asp-N。得到的缓冲液浓度为 10 mM Tris-HCl，pH 7.5。为避免自溶，孵育温度不得超过 37°C。
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文献和实验细胞色素氧化酶和过氧化物酶，是Na―di反应用于检测氧化酶的方法。把二甲基―对―苯二胺和a―萘酚加入底物混合液中，由酶作用而释放的氧与此两者结合，形成靛酚蓝而显示酶的部位。也可以用4―氨基―N、N―二甲基萘胺(AND)代替二甲基―对―苯二胺。靛酚盐法原理 (3)靛蓝形成法(indigo formatlon method)：又称靛蓝法或吲哚酚法，在酶作用下，分解底物酯型吲哚酚化合物，产生出吲哚酚，在氧存在的情况下形成蓝色靛蓝，使酶存在部位显色。
qiangshou2010 我想问个这几天一直想不明白的事情。 现在人类基因组测序早就完成了，也开始了其它物种的测序，包括猴子---恒河猴，rhesus,这几天我查了猴子的几个基因，发现在它的序列里包括了一部分的N。这些N表示什么意思呢？是当时没有测出来？还是不能找到合适的样本，才测不出来的？ 在哪里可以查到序列完全测出来的物种呢？就拿猴子来说，哪种猴子的序列是测全了的呢？ zhujoker
1 ug）。 Edman降解法测序的质量随着氨基酸加工数量的增加而降低，因此该测序发通常用于确定前30-50个氨基酸，很少用于抗体全序列测定。 基于质谱的抗体测序法 质谱法已成为抗体全序列测定的首选方法。在几乎所有用于抗体测序的质谱方案中，都会先将抗体分解成15-20个氨基酸长的肽，然后在质谱仪中进行分析。在理想情况下，每种肽都可产生片段图谱。进行抗体从头测序时，需要对每个片段图谱进行解析并揭示抗体的一部分序列。通常，我们用具有不同切割基序的多种酶来分解抗体，从而确保抗体的每个区域均可产生几个重叠
