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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
膜粘连蛋白-5抗体
- 抗体英文名:
Anti-Annexin V 膜粘连蛋白-5抗体
- 抗原:
来电咨询
- 浓度:
1mg/ml
- 应用范围:
科研使用
- 宿主:
Goat,Rabbit,Mouse
- 适应物种:
人,大鼠,小鼠,兔
- 是否单克隆:
多克隆
- 保存条件:
-20℃
- 形态:
液态/粉状
- 规格:
0.1ml/0.2ml
抗体制备
1、20ml兔多克隆抗体血清原液(小鼠为5ml腹水)
2、经亲和层析纯化抗体IgG 10mg
3、多肽抗原3mg(用于客户自行检测抗体使用)
提供1ml经亲和层析纯化的抗体,IgG含量:500ug/ml
抗体效价
1:8000以上(ELISA)
1:200-500以上(免疫组化)
1:500-1000(ELISA)
1:200-500(WB)
说 明 书
提供抗体制备报告及抗体使用说明书
抗体使用说明书
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文献和实验免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原(一般为蛋白质)并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,再通过电泳转移到固相支持物上,固相支持物包括硝酸纤维素膜,聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附,这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射,生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
200μLPBST,浸泡3-5mins后扣出洗涤液,重复5次。最后一次,在吸水纸上扣干。 注意: (1)有实验者认为,洗涤检测抗体和酶标亲和素时,膜的背面也需要清洗。经我们验证,不清洗膜的背面也完全可以得到满意的结果,但是如果清洗,背景会更干净一些。所以,清洗膜的背面为实验的优化步骤,是否略过,由实验者自行决定。 (2)洗涤膜的背面,我们的方法是:在洗涤最后一次时,将去除塑料保护层的PVDF膜板底面浸入盛有干净PBST的浅托盘中,轻轻漂洗几次即可。 (3)一定要将膜背面和塑料保护层上的液体
减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。 通常用 0.45μ m 和 0.2μm 两种规格的 NC 膜。 大于20kD 的蛋白可用 0.45μm 的膜, 小于 20kD的蛋白就要用 0.2μ m 的膜了, 如用0.45μ m 的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF 膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低 分子量蛋白的检测。但 PVDF 膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和 1-5 秒钟。 蛋白质常用的转移方法主要有两种:槽式湿转和半干转移。前者操作容易
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