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- 2025年07月13日
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上海联硕生物科技有限公司
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| Chelating Sepharose FF | pharmacia | 25ml |
| Ni-NTA Superflow镍NTA琼脂糖凝胶 FF | pharmacia | 10ml |
| ProteinA SepharoseCL-4B蛋白A琼脂糖凝胶CL-4B | pharmacia17-0780-01 | 500mg |
| ProteinA SepharoseCL-4B蛋白A琼脂糖凝胶CL-4B | pharmacia | 1.5g |
| rProtein A Sepharose F.F重组蛋白A琼脂糖凝胶 FF | pharmacia | 5ml |
| Glutathione Sepharose 4FFGST琼脂糖凝胶 4FF | pharmacia | 25ml |
| Arginine Sepharose 4B精氨酸琼脂糖凝胶 4B | pharmacia | 25ml |
| Lysine Sepharose 4B赖氨酸琼脂糖凝胶 4B | pharmacia | 25ml |
| Benzamidine Sepharose 6B 苯甲脒琼脂糖凝胶 6B | pharmacia | 25ml |
| Benzamidine Sepharose 4FF 苯甲脒琼脂糖凝胶 FF | pharmacia | 25ml |
| Con A Sepharose C0nA-琼脂糖凝胶 | pharmacia170440-01 | 5ml |
| Gelatin Sepharose 4B明胶琼脂糖凝胶 4B | pharmacia170956-01 | 25ml |
| PlasmidselectDNA纯化琼脂糖凝胶 FF | pharmacia | 25ml |
| Blue Sepharose 6F.F蓝色琼脂糖凝胶6 FF | pharmacia17-0948-01 | 25ml |
| Red Sepharose 6F.F红色琼脂糖凝胶 6FF | pharmacia | 25ml |
| Heparin Sepharose 6 F.F肝素琼脂糖凝胶6 FF | pharmacia17-0998-01 | 25ml |
| IgG Sepharose 6 F.FIgG琼脂糖凝胶6 FF | pharmacia17-0969-01 | 10ml |
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文献和实验性结合到柱子里，其他的杂蛋白流出。Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱，梯度洗脱，咪唑竞争性结合到硫酸镍上，目的蛋白就被洗脱了，这时候收集浸出液，那么里面就是你要的目的蛋白，然后透析掉咪唑就行了。现在的柱子大多是预装柱，也就是不用自己填柱，就是装好镍的傻瓜柱，也不贵，上样，洗脱，基本两个步骤就结束了。剩下的看你怎么处理了。 高亲和Ni-NTA纯化介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂 糖介质(4%交联)上，然后再螯合Ni2+制备
是 Sepharose CL-6B，最大流速是每分钟 1 毫升，可耐受的最 大柱内压 2.8psi(0.2bar)，适合自己装重力流常压液相层析柱，可以根据每次实验目标蛋 白的含量来调整纯化填料的使用量和装柱的长度，比较灵活避免浪费。不过但凡客户问到， 我都愿意推荐 Ni-NTA Superflow。Ni-NTA Superflow 介质是高度交联的琼脂糖凝胶，同样 只需一步就从澄清的细菌裂解物中纯化得到带有 HisTag 的融合蛋白，可以耐受天然或者变 性条件，包括 8M 尿素，或者 6M 盐酸胍，还可以耐受
经常用于亲和纯化的His-Tag，该His-Tag也可用于通过蛋白质印迹纯化后鉴定融合蛋白。以下是通过Ni-NTA旋转试剂盒（QIAGEN）在天然条件下纯化蛋白质的方法。蛋白质印迹分析融合蛋白的表达。在大肠杆菌 BL21菌株中表达TBO的融合蛋白，经NI-NTA旋转试剂盒纯化后，使用抗His标签抗体通过Western印迹分析蛋白质。Trx。Tag + TBO为22 KDa将来自5-ml培养体积的沉淀重悬于630μl裂解缓冲液（NPI-10）中，在冰上以30秒的间隔超声处理细胞悬浮液10秒短暂10
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