植物基因组DNA提取试剂

规格：50T/ 100T
保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。

试剂盒内容：	D1500-50T	D1500-100T
RNase A	1ml	1ml×2
β-巯基乙醇	300ul	600ul
溶液PA	20ml	40ml
溶液PB	7ml	14ml
溶液PC	30ml	60ml
漂洗液	15ml	15ml×2
洗脱液	15ml	30ml
吸附柱	50个	100个
收集管	50个	100个
说明书	1份	1份

产品简介： 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植物基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤： 使用前先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过100mg）或干重组织（不超过20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有400ul溶液PA、20ul RNase A（10mg/ml）和5ul β-巯基乙醇的离心管中，充分颠倒混匀，室温放置10min。3、加入140ul溶液PB，充分颠倒混匀，12000rpm离心10min，将上清转移至新离心管中(约400-500ul)，注意不要吸入沉淀。4、加入和上清相同体积的溶液PC，充分颠倒混匀，再加入和溶液PC相同体积的无水乙醇，此时若出现絮状物，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm离心5min，弃废液，一次加不完可分两次加入。注意：如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入600ul无水乙醇，并适当延长离心时间。5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管。6、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中， 12000rpm离心2min。7、将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟，否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。8、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置1-5min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的植物基因组DNA。9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min。
注意事项：
1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，富含多糖多酚的组织可能会提取失败，请选用多糖多酚专用试剂盒。2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在65℃水浴中融化，不影响使用。3、洗脱缓冲液的体积不能小于50ul，DNA产物应-20℃保存。

相关文献：
《First Report of Neofusicoccum parvum Associated with Blotch Trunk Disease of Koelreuteria paniculata in China》 作者:X. M. Fang, Y. L. Zeng, Z. J. Li, S. J. Li, and T. H. Zhu 期刊:Plant Disease 影响因子:3.583 PMID: