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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
1年
- 英文名:
植物基因组DNA提取试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
Solarbio
- CAS号:
D1500
- 保存条件:
RT
- 规格:
50T/100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥300.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥560.0 |
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。
| 试剂盒内容: | D1500-50T | D1500-100T |
| RNase A | 1ml | 1ml×2 |
| β-巯基乙醇 | 300ul | 600ul |
| 溶液PA | 20ml | 40ml |
| 溶液PB | 7ml | 14ml |
| 溶液PC | 30ml | 60ml |
| 漂洗液 | 15ml | 15ml×2 |
| 洗脱液 | 15ml | 30ml |
| 吸附柱 | 50个 | 100个 |
| 收集管 | 50个 | 100个 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
操作步骤: 使用前先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过100mg)或干重组织(不超过20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有400ul溶液PA、20ul RNase A(10mg/ml)和5ul β-巯基乙醇的离心管中,充分颠倒混匀,室温放置10min。3、加入140ul溶液PB,充分颠倒混匀,12000rpm离心10min,将上清转移至新离心管中(约400-500ul),注意不要吸入沉淀。4、加入和上清相同体积的溶液PC,充分颠倒混匀,再加入和溶液PC相同体积的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm离心5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。注意:如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入600ul无水乙醇,并适当延长离心时间。5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管。6、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中, 12000rpm离心2min。7、将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟,否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置1-5min,12000rpm离心2min,即可得到高质量的植物基因组DNA。9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心2min。
注意事项:
1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本,富含多糖多酚的组织可能会提取失败,请选用多糖多酚专用试剂盒。2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀,可在65℃水浴中融化,不影响使用。3、洗脱缓冲液的体积不能小于50ul,DNA产物应-20℃保存。
相关文献:
《First Report of Neofusicoccum parvum Associated with Blotch Trunk Disease of Koelreuteria paniculata in China》 作者:X. M. Fang, Y. L. Zeng, Z. J. Li, S. J. Li, and T. H. Zhu 期刊:Plant Disease 影响因子:3.583 PMID:
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,实验准备-试剂盒准备1:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2:准备实验时,将缓冲
任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留(一般电泳EB染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物
,加入适量的灭菌ddH2 O或TE溶解DNA。9 电泳检测完整性。三、结果分析 1. 用紫外分光光度计在230nm、260nm、 280nm和310nm波长分别读数。其中260nm用琼脂糖凝胶电泳(0.8%)检测核DNA的完整性(见图2 )。 完整性好的基因组DNA应是一条比23Kb滞后的电泳带, 若降解则成为弥散状。 电泳前缘为未除干净的RNA。 2.如果DNA沉淀呈白色透明状而且溶解后成粘稠状,说明DNA含有较多的多糖类物质,可以在取材前将植物放暗处24hr,以达到去除淀粉的目的










