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- YA0762
- 2025年09月20日
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- 库存：
大量
- 供应商：
Solarbio
- 现货状态：
现货
- 保修期：
30天
- 规格：
20片
品牌：Solarbio | 货号：YA0762
单位 : 个
免疫组化用
湿盒具有两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后，加一抗，一般是37°C一小时，或者室温2小时，或者4°C过夜。无论怎样，时间都比较长，抗体容易干掉，干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以，加入一抗之后，放入一个可以密封的盒子里，再放一些湿的滤纸或者海绵，可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光，否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的，盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。
使用方法
第一步，信号源（膜）的放置：将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置，将一层透明薄膜覆盖在膜上；
第二步，调试适当的红外光强度，将暗室中其它的灯光关闭，使暗室中只存在红外光，在红外光的条件下取出胶片，裁剪合适大小，做好标示，正压在膜上，然后盖上暗盒，计时。
第三步，取出暗盒中的胶片进行显影等操作。
注意事项
1，保持暗盒表面和内部的干净整洁，因为污物有可能会有荧光信号，对结果造成不利影响。
2，暗盒的使用时注意白光和红外光的分段，在压胶片收集信号时，暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射
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文献和实验性笔在组织周围画圈，然后滴加稀释好的一抗，如果做阴性对照实验，就在对照组的组织上滴加 PBS。加完一抗后于 4 °C湿盒中孵育过夜。（抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定，时间控制在 15h 以上）。 PBS 冲洗切片 3 次，每次 3 min，吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗 ，37 ℃ 孵育 30 min。 信号检测 PBS 冲洗切片 4 次，每次 3 min，甩去 PBS 液体后吸水纸擦干切片，每张切片滴加新鲜配制的 DAB 显色液，显微镜下观察，阳性信号为棕黄色或棕褐色，时间
我做的是大鼠肾脏 MMP-9 和 PAI-1 的免疫组化染色。MMP-9 为山羊抗鼠的，PAI-1 为兔抗鼠的，均为中山公司产品。选用中山公司相应的二抗试剂盒。反复做了好几批片子可结果总是不尽如人意，背景颜色比较深，难以判断阳性结果。 具体步骤如下： 1、石蜡包埋组织切片 4μm，用的是中山公司的多聚赖氨酸防脱片的玻片，捞片后置 60℃ 烤箱烤片 2-4 小时。 2、半月后，脱蜡水化 3、PBS 液冲洗，3 分钟×3； 4、切片置于 1％triton-x-100
一、石蜡切片和冰冻切片的比较？ 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写
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