PCR反应板

【心得】realtime pcr 个人经验分享

。如果CT值超过30个循环以后，就不适宜做梯度稀释了，因为这个时候浓度太低，定量本来就不准，所以梯度稀释结果不能用作参考的。6. 标准曲线：通常有些人做很多标本，要用不同的pcr反应板，不能同时一次进行，这时每个反应板最好做标准曲线，斜率相差小于0.1，结果可认为具有可比性。且扩增斜率要在-3.6到-3.1之间结果最好。当然了，这个时候因为每个板都做标准曲线了，分析的时候既可以用detadetaCT法，也可以用双标准曲线法了。7. 如何理解标本做复孔的问题：原来我一直都不理解标本做复孔的问题

PCR芯片技术操作流程

选出最佳的候选引物，接着通过实验，在不同反应条件下，检测PCR反应体系与几千条PCR引物的组合，最终获得了优化的引物和PCR反应体系，适应PCR芯片的要求。4.检测数量 根据一次实验所检测样品数量的多少，可将PCR 芯片分为低通量和高通量 PCR 芯片。低通量PCR 芯片的载体为96 孔或 384 孔 PCR反应板，仅须将制备好的样品cDNA加入相应的反应孔内，在荧光定量PCR 仪上进行扩增即可。在灵敏度方面，每次扩增仅需400 ng 总 RNA。但低通量PCR 芯片所检测的基因数量有限