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- 2026年07月03日
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针筒过滤器Ф13 0.2 /0.45μ（PVDF）
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文献和实验BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。 通常用 0.45μ m 和 0.2μm 两种规格的 NC 膜。 大于20kD 的蛋白可用 0.45μm 的膜， 小于 20kD的蛋白就要用 0.2μ m 的膜了， 如用0.45μ m 的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF 膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高，非常适合于低 分子量蛋白的检测。但 PVDF 膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和 1-5 秒钟。 蛋白质常用的转移方法主要有两种：槽式湿转和半干转移。前者操作容易
时间： 85 min 转膜设备: BIO-rad 转膜设备。其间，准备一个冰盒，将电泳槽半埋到冰里。 转膜液的配制：（2.92 g甘氨酸，5.8 g tris，0.375 g SDS，200 ml甲醇，用双蒸水定容到1 L） 蛋白来源：宫颈癌细胞 蛋白名称：保密 蛋白分子量：60 kD WB用膜类型、孔径：PVDF膜 0.45 uM 转膜方式（恒压、恒流）：恒流，按膜的面积来算电流，标准大小的膜-60 mA/张 （8.2 cm x
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